ヒトＫ－ｒａｓ遺伝子転写抑制剤

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特許コード

P08S000133

発明の名称

ヒトＫ－ｒａｓ遺伝子転写抑制剤

整理番号

P2004-097-JP02

データ収録日

2008年12月25日

出願番号

特願2006-542246

国際出願番号

PCT/JP2005/012204

国際公開番号

WO 2006/046331

国際出願日

平成１７年７月１日（２００５．７．１）

国際公開日

平成１８年５月４日（２００６．５．４）

発明者

畠山昌則
柳原正智

出願人

国立大学法人北海道大学

発明の概要

【要約】配列番号１に示されるアミノ酸配列よりなる蛋白質、配列番号１に示されたアミノ酸配列において１もしくは数個のアミノ酸が置換、欠失もしくは付加されたアミノ酸配列よりなる蛋白質であってヒトＫ－ｒａｓ遺伝子転写抑制活性を有する蛋白質、またはそれらのヒトＫ－ｒａｓ遺伝子転写抑制活性を有する部分断片蛋白質よりなる群から選ばれる一もしくはそれ以上の蛋白質からなる、ヒトＫ－ｒａｓ遺伝子転写抑制剤。本発明のＫ－ｒａｓ遺伝子転写抑制剤は、ヒト癌細胞において癌遺伝子であるＫ－ｒａｓ遺伝子の転写発現を特異的に抑制することにより、癌細胞の増殖抑制、さらには癌細胞の正常細胞への復帰を誘導することができ、正常細胞に対し副作用の少ない抗癌剤となり得る。

従来技術、競合技術の概要

【背景技術】Ｒａｓは、発ガンウイルスにより誘導される悪性腫瘍の原因となる遺伝子として最初に同定されたガン遺伝子（非特許文献１、非特許文献２）であり、Ｒａｓ遺伝子群（Ｈ－Ｒａｓ、Ｋ－Ｒａｓ、Ｎ－Ｒａｓ、Ｒ－Ｒａｓ）を構成している。Ｒａｓ遺伝子は、分子量２１ｋＤａのＧＴＰ結合タンパク質をコードしており、いずれも成長因子の受容体を介してＧＤＰ結合型からＧＴＰ結合型へと活性化されることで、ＭＡＰキナーゼカスケードにシグナルを伝達して細胞の増殖や分化に関与している。Ｒａｓ遺伝子（蛋白質）はそのままでは発癌活性を持たないが、これらの遺伝子に変異が生じると発癌活性を獲得し、該変異を有する細胞が形質転換されることが知られている（非特許文献３）。これまでにも数多くのヒトの癌細胞においてＲａｓ遺伝子の突然変異が報告されている（非特許文献４）。Ｒａｓ遺伝子群を構成するＫ－Ｒａｓ遺伝子は、ヒト第１２染色体の短腕上に位置している。その活性化型変異体（Ｋ－ｒａｓ癌遺伝子）は、ヒトの癌において最も多く見いだされる癌遺伝子の一つであり、ヒト大腸癌の約５０％、肺癌の２５～５０％、膵癌の７０～９０％においてその存在が認められている（非特許文献５、非特許文献６）。これらの癌では、Ｋ－ｒａｓ癌遺伝子からの変異型Ｋ－Ｒａｓ蛋白質の持続的な発現、生成が、細胞の癌化ならびに癌細胞としての形質維持に必要不可欠であることが明らかとなっている。このため、生体内において、ｒａｓ遺伝子、例えばＫ－ｒａｓ遺伝子、特にＫ－ｒａｓ癌遺伝子の発現あるいはＫ－ｒａｓ癌遺伝子産物の機能を抑制することで、癌を抑制しようとする試みがなされている。例えば、ＲＡＳ遺伝子に対するアンチセンスオリゴヌクレオチドを用いたＲＡＳ遺伝子の阻害（特許文献１）や、ファルネシルアミン、ゲラニルゲラニルアミンまたはそれらの誘導体の有効量を用いた膵癌治療剤が知られている（特許文献２）。本発明は、Ｋ－ｒａｓ遺伝子、特にＫ－ｒａｓ癌遺伝子の発現を抑制することのできる蛋白質性の医薬を提供するものである。
【特許文献１】ＷＯ９９／０２７３２公報
【特許文献２】特開平１０－２１８７６４号公報
【非特許文献１】Ｂａｒｂａｃｉｄ，Ｍ．，Ａｎｎｕ．Ｒｅｖ．Ｂｉｏｐｈｅｍ．５６，７７９－８２７（１９８７）
【非特許文献２】Ｌｏｗｙ，Ｄ．Ｒ．＆Ｗｉｌｌｕｍｓｅｎ，Ｂ．Ｍ．，Ａｎｎｕ．Ｒｅｖ．Ｂｉｏｐｈｅｍ．６２，８５１－８９１（１９９３）
【非特許文献３】ＳｔｏｒｅｒＲＤｅｔａｌ．ＣａｎｃｅｒＲｅｓ．４６：１４５８－１４６４，１９８６
【非特許文献４】ＭｉｎａｍｏｔｏＴｅｔａｌ．ＣａｎｃｅｒＤｅｔｅｃｔｉｏｎａｎｄＰｒｅｖｅｎｔｉｏｎ２４：１－１２，２０００
【非特許文献５】Ｃｌａｒｋ，Ｇ．Ｊ．＆Ｄｅｒ，Ｃ．Ｊ．，ＣｅｌｌｕｌａｒＣａｎｃｅｒＭａｒｋｅｒｓ（ｅｄｓＧａｒｒｅｔｔ，Ｃ．Ｔ．＆Ｓｅｌｌ，Ｓ．）１７－５２（ＨｕｍａｎａＰｒｅｓｓ，Ｔｏｔｏｗａ，ＮｅｗＪｅｒｓｅｙ（１９９５）
【非特許文献６】Ｂｏｓ，Ｊ．Ｌ．，ＣａｎｃｅｒＲｅｓ．４９，４６８２－４６８９（１９８９）

産業上の利用分野

本発明は、ヒトのガン遺伝子であるＫ－ｒａｓ遺伝子、特にＫ－ｒａｓ癌遺伝子の発現を特異的に抑制することのできるヒトＫ－ｒａｓ遺伝子転写抑制剤ならびにヒトＫ－ｒａｓ遺伝子転写抑制活性を有する蛋白質に関する。

特許請求の範囲

【請求項１】配列番号１に示されるアミノ酸配列よりなる蛋白質、配列番号１に示されたアミノ酸配列において１もしくは数個のアミノ酸が置換、欠失もしくは付加されたアミノ酸配列よりなる蛋白質であってヒトＫ－ｒａｓ遺伝子転写抑制活性を有する蛋白質、またはそれらのヒトＫ－ｒａｓ遺伝子転写抑制活性を有する部分断片蛋白質よりなる群から選ばれる一もしくはそれ以上の蛋白質からなる、ヒトＫ－ｒａｓ遺伝子転写抑制剤。
【請求項２】部分断片蛋白質が、分子量４５ｋｄのＮ末端断片である、請求項１に記載のヒトＫ－ｒａｓ遺伝子転写抑制剤。
【請求項３】部分断片蛋白質のアミノ酸配列が、配列番号１の１～２２９番目のアミノ酸配列または１～２２９番目のアミノ酸配列において１もしくは数個のアミノ酸が置換、欠失もしくは付加されたアミノ酸配列である、請求項２に記載のヒトＫ－ｒａｓ遺伝子転写抑制剤。
【請求項４】配列番号２～４に示された何れかのアミノ酸配列からなる蛋白質、または配列番号２～４に示された何れかのアミノ酸配列において１または数個のアミノ酸が置換、欠失もしくは付加され、かつヒトＫ－ｒａｓ遺伝子転写抑制活性を有する蛋白質。
【請求項５】請求項４に記載の蛋白質をコードする核酸。
【請求項６】配列番号２～４の何れかに示された塩基配列からなる核酸、または配列番号２～４に示された何れかの塩基配列にストリンジェントな条件下でハイブリダイズする塩基配列からなり、かつヒトＫ－ｒａｓ遺伝子転写抑制活性を有する蛋白質をコードする核酸。
【請求項７】請求項１～４に規定される蛋白質をコードする核酸、請求項５または６に記載の核酸のいずれかを含む、癌の遺伝子治療用組換えウイルスベクター。
【請求項８】請求項５または６のいずれかに記載の核酸を含む組換えベクター。
【請求項９】請求項１～３の何れかに記載の記載のヒトＫ－ｒａｓ遺伝子転写抑制剤または請求項４に記載の蛋白質を癌細胞に投与することを特徴とする、癌の治療方法。
【請求項１０】請求項７に記載の組換えウイルスベクターを患者の癌細胞に導入することを含む、癌の遺伝子治療方法。

国際特許分類(IPC)

C12N 15/09 (2006.01)	組換えＤＮＡ技術
C07K 14/47 (2006.01)	哺乳動物から
A61K 38/00 (2006.01)	ペプチドを含有する医療製剤
A61P 35/00 (2006.01)	抗腫瘍剤
A61P 43/00 (2006.01)	グループ１／００から４１／００に展開されていない特殊な目的の医薬
A61K 48/00 (2006.01)	遺伝子疾病を治療するために生体の細胞内に挿入する遺伝子物質を含有する医療用製...
A61K 35/76 (2006.01)	ウイルス