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顕微鏡用極薄照明光発生装置および前記装置を用いた観察方法 コモンズ

国内特許コード P07A013107
整理番号 431
掲載日 2008年2月22日
出願番号 特願2003-186769
公開番号 特開2005-024597
登録番号 特許第4465460号
出願日 平成15年6月30日(2003.6.30)
公開日 平成17年1月27日(2005.1.27)
登録日 平成22年3月5日(2010.3.5)
発明者
  • 寺川 進
出願人
  • 国立大学法人浜松医科大学
発明の名称 顕微鏡用極薄照明光発生装置および前記装置を用いた観察方法 コモンズ
発明の概要

【課題】顕微鏡用極薄照明光発生装置および前記顕微鏡用極薄照明光発生装置を用いて、細胞等の立体情報を獲得することができる観察方法を提供する。
【解決手段】本発明による顕微鏡用極薄照明光発生装置は、光源と、光源からの光をスリット光に変換するスリット光形成手段9と、試料11が載せられる透明板5と、前記板と試料側の媒質の界面に前記スリット光を全反射角よりやや小さい角度で入射させ、屈折光が前記スリット光より薄く、かつ前記界面と僅かな角度を保って発生し極薄照明光8となるように入射させる入射手段とを含んでいる。
スリット光光路変更手段は、前記極薄照明光8が前記界面に対して異なる高さになるように前記スリット光の光路を変更する。
前記装置を利用する本発明方法によれば、細胞等の立体情報が獲得できる。
【選択図】 図3

従来技術、競合技術の概要
細胞や組織の切断・断層像を得る従来の方法は微分干渉法や共焦点走査顕微鏡法である。これらは約1マイクロメートルの厚みの断層像を形成する。
これらの光学的切断法は、ピンホールまたはプリズムによる焦点面画像の選択的取得に基づいており、焦点面前後の面から到来する光がこれらの光学素子によって排除されることで、断層像ができる。
ピンホールの大きさで切断の厚みが決まるが、ピンホールを小さくしすぎると暗い像となる。プリズムの場合は、もっぱら対物レンズの開口数の作用によって切断能が決まる。光自体は薄いものとはなっておらず、標本上での照明領域は大きい。
産業上の利用分野
本発明は、試料を光学的に断面する顕微鏡用極薄照明光発生装置および前記装置を用いた観察方法に関する。
特許請求の範囲 【請求項1】 一点に集光する光を発生する光源と、
光源からの光をスリット光に変換するスリット光形成手段と、
試料が載せられる透明板と、
前記光源の集光する点は顕微鏡の対物レンズの瞳面内の一点に形成し、前記スリット光形成手段からのスリット光を前記透明板と試料側の媒質の界面に全反射角より小さい角度で入射させ、その屈折光を、その厚みが前記スリット光の厚みより薄く、かつ前記界面に対し極薄照明光が発生する角度で試料側の媒質に射出させる顕微鏡の対物レンズと、
前記極薄照明光が前記界面に対して一定の角度を保ちながらレンズ中心光軸上にて異なる高さになるように前記スリット光形成手段のスリットを移動させ前記スリット光の光路を変更するスリット光光路変更手段と、
から構成した顕微鏡用極薄照明光発生装置。
【請求項2】 前記光源はレーザ光源であり、前記透明板はカバーガラスであり、前記対物レンズの、前記スリット光形成手段からのスリット光を入射させる位置は、対物レンズの周縁部であることを特徴とする請求項1記載の顕微鏡用極薄照明光発生装置。
【請求項3】 前記スリット光形成手段は、光源からの光を最小のスリット光に変換する第1スリット板と、前記スリット板で形成された側帯回折光を除去する第2スリット板から構成されている請求項1記載の顕微鏡用極薄照明光発生装置。
【請求項4】 請求項1記載の顕微鏡用極薄照明光発生装置を用いる顕微鏡観察方法であって、
顕微鏡の前記透明板に標本を配置するステップと、
前記スリット光の光路を前記スリット光光路変更手段により移動させることにより前記極薄照明光を界面に対し一定の角度を保ちながらレンズ中心光軸上にて標本内の異なる高さ位置に形成し、この極薄照明光の通過した1以上の切断面から前記極薄照明光に励起されて発生した信号光の情報を取得するステップと、
前記切断面の情報に基づいて切断面の情報または複数の切断面の情報よりなる立体情報を再生するステップから構成した顕微鏡観察方法。
産業区分
  • 光学装置
  • 試験、検査
国際特許分類(IPC)
Fターム
画像

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JP2003186769thum.jpg
出願権利状態 権利存続中
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