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白色花を生じるトルコギキョウ[Eustomagrandiflorum(Raf.)Shinn.]を選別する方法

国内特許コード P120008417
整理番号 RX12P12
掲載日 2012年12月19日
出願番号 特願2011-518602
登録番号 特許第5709140号
出願日 平成22年6月10日(2010.6.10)
登録日 平成27年3月13日(2015.3.13)
国際出願番号 JP2010060256
国際公開番号 WO2010143749
国際出願日 平成22年6月10日(2010.6.10)
国際公開日 平成22年12月16日(2010.12.16)
優先権データ
  • 特願2009-139477 (2009.6.10) JP
発明者
  • 坂田 祐介
  • 橋本 文雄
  • 清水 圭一
  • ウレド ラバ イセルモ
出願人
  • 国立大学法人 鹿児島大学
発明の名称 白色花を生じるトルコギキョウ[Eustomagrandiflorum(Raf.)Shinn.]を選別する方法
発明の概要 本発明は、トルコギキョウの白色花に関連する遺伝子マーカーの開発、及び該マーカーを利用した、開花前に又は有色品種から、白色花を生じるトルコギキョウを選別する方法、具体的には、トルコギキョウ[Eustoma grandiflorum(Raf.)Shinn.]のDNAサンプルから、アントシアニン合成酵素(ANS)遺伝子中の白色花関連マーカー又は有色花関連マーカーのいずれかを検出することを含む、白色花を生じるトルコギキョウを選別する方法、及び該方法を実施するためのキットに関する。
従来技術、競合技術の概要


トルコギキョウ[Eustoma grandiflorum(Raf.)Shinn.]は、リンドウ科に属し、アメリカ南西部を原産とする一年性の草本である。本種は、その大きな花と長い茎、そして花持ちのよさの点で、日本で最も人気の高い切花の一つとなっている。典型的なトルコギキョウの野生種の花色は紫色であり、その主要色素はデルフィニジン系のアントシアニンである。主に日本における商業育種によって、ピンク、白、クリーム色、藤色、赤などの多様な花色の系統が作出されているが、更なる花色の多彩化、効率的な花色育種法が望まれている。
例えば、花色の複対立遺伝子が提唱されているが、白色花の形成機構はまだDNAレベルでは詳しく証明されていない(特許文献1)。
一方、野田らは、トルコギキョウでアントシアニン合成に関わるフラボノール合成酵素(FLS)、ジヒドロフラボノール4還元酵素(DFR)、カルコン合成酵素(CHS)、アントシアニン合成酵素(ANS)などの発現を詳しく解析しているが、これらの遺伝子と白色花との関係は不明である(非特許文献1)。

産業上の利用分野


本発明は、トルコギキョウ[Eustoma grandiflorum(Raf.)Shinn.]のアントシアニン合成酵素(ANS)遺伝子中の白色花関連マーカーを利用した、白色化を生じるトルコギキョウの選別方法、及び白色化を生じるトルコギキョウを選別するためのキットに関する。

特許請求の範囲 【請求項1】
トルコギキョウ[Eustoma grandiflorum (Raf.) Shinn.]のDNAサンプルから、アントシアニン合成酵素(ANS)遺伝子中の有色花関連マーカーを検出することを含む、白色花を生じるトルコギキョウを選別する方法であって、前記有色花関連マーカーは、配列番号1のヌクレオチド2366~2459若しくは配列番号19のヌクレオチド2379~2472、又は配列番号1のヌクレオチド2366~2459若しくは配列番号19のヌクレオチド2379~2472において、1~数個のヌクレオチドの置換、付加、欠失若しくは挿入を含むポリヌクレオチドである、前記方法

【請求項2】
配列番号1のヌクレオチド2366~2459又は配列番号19のヌクレオチド2379~2472に隣接する5'側配列及び3'側配列に特異的にアニーリングすることができる正方向プライマー及び逆方向プライマーから成るプライマーセットによるDNAサンプルのPCR増幅と、その後の電気泳動によって、ANS遺伝子の遺伝子型の決定を行うことを特徴とする、請求項1記載の方法。

【請求項3】
前記プライマーセットは、配列番号3に示す正方向プライマー及び配列番号4に示す逆方向プライマーから成ることを特徴とする、請求項2記載の方法。

【請求項4】
配列番号1のヌクレオチド2366~2459又は配列番号19のヌクレオチド2379~2472に隣接する5'側配列と3'側配列に特異的にアニーリングすることができる正方向プライマー及び逆方向プライマーから成るプライマーセットを含む、白色花を生じるトルコギキョウを選別するためのキット。

【請求項5】
前記プライマーセットは、配列番号3に示す正方向プライマー及び配列番号4に示す逆方向プライマーから成ることを特徴とする、請求項4記載のキット。
産業区分
  • 微生物工業
  • 農林
国際特許分類(IPC)
Fターム
画像

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JP2011518602thum.jpg
出願権利状態 登録
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