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キャピラリーゾーン電気泳動法における仮想的浸透流を用いた電気泳動時間-実効移動度変換法

国内特許コード P020000055
整理番号 U1999P041
掲載日 2003年5月27日
出願番号 特願平11-251604
公開番号 特開2001-074694
登録番号 特許第3259032号
出願日 平成11年9月6日(1999.9.6)
公開日 平成13年3月23日(2001.3.23)
登録日 平成13年12月14日(2001.12.14)
発明者
  • 育田 夏樹
  • 廣川 健
出願人
  • 広島大学
発明の名称 キャピラリーゾーン電気泳動法における仮想的浸透流を用いた電気泳動時間-実効移動度変換法
発明の概要 ジュール熱による移動度増加を除去し、再現性のよい定性指標を得る方法に関する発明である。この方法は、キャピラリーゾーン電気泳動法における仮想的浸透流を用いた電気泳動時間-実効移動度変換方法であり、未知試料に標準物質を添加してキャピラリーゾーン電気泳動を実行し、標準物質の泳動時間を求める。次に、浸透流の速度が時間に直線的に依存していると仮定して、前記標準物質の泳動時間から実効移動度に変換する。結果として、この新しい変換法では印加電圧の違いによらずほとんど同じフェログラムを得ることができる。
従来技術、競合技術の概要 キャピラリーゾーン電気泳動が広く普及するには、ピークポジションの再現性が高いことが必要である。なぜなら、それは直接定性指標として用いられるからである。横軸として時間を用いたとき、再現性の良い横軸を得るために最も重要となるファクターは泳動電圧(電流)、分離チャンバーの温度、および、電気浸透流のコントロールである。しかしながら、同じ条件下で、前者2つを完全にコントロールしても、セパレーションチューブの温度上昇はジュール熱によって避けられず、電気浸透流の制御は容易ではない。これらの理由により時間軸を持つ通常のCZEフェログラムの分析再現性はHPLCほど高くない。
最も困難な問題は電気浸透流がキャピラリー内部の状態や履歴により変化することである。従来技術によれば、印加電圧を上昇させると、ジュール熱によりキャピラリー内温度が上昇するため、実効移動度が大きく見積もられる。従って、印加電圧を変えたときには、未知試料の同定が困難になる。即ち、未知試料に含まれていると思われる物質を含んだ溶液を精密に測定するために印加電圧を5kVでキャピラリーゾーン電気泳動を行い、未知試料は迅速分析のために30kVでキャピラリー電気泳動を行ったとすると、未知試料に含まれるイオンの移動度が大きくなるために誤同定してしまう問題がある。
産業上の利用分野 キャピラリーゾーン電気泳動法における仮想的浸透流を用いた電気泳動時間?実行移動度変換法
特許請求の範囲 【請求項1】未知試料に標準物質を添加してキャピラリーゾーン電気泳動を実行し、標準物質の泳動時間を求めるステップと、
浸透流の速度が時間に直線的に依存していると仮定して、前記標準物質の泳動時間から実効移動度に変換するステップと、
を具備することを特徴とするキャピラリーゾーン電気泳動法における仮想的浸透流を用いた電気泳動時間ー実効移動度変換方法。
【請求項2】移動度がmA,mBである2つの標準物質の泳動時間tA、tBから、仮想的浸透流の速度veof,hypを時間の一次関数 veof,hyp=at+bとして求めるステップと、
未知試料の泳動時間tから未知試料の速度を求めて、前記仮想的浸透流の速度veof,hypとの差を求めるステップと、
前記差をキャピラリーの平均電位勾配Eで割るステップと、
を具備することを特徴とするキャピラリーゾーン電気泳動法における仮想的浸透流を用いた電気泳動時間ー実効移動度変換方法。
【請求項3】遅延時間τを導入して、移動度がmA,mB,mCの3つの標準物質の泳動時間tA、tB、tCから、仮想的浸透流の速度veof,hypを時間の一次関数 veof,hyp=a(t-τ)+bとして求めるステップと、
未知試料の泳動時間tと遅延時間τとから未知試料の速度を求めて、前記仮想的浸透流の速度veof,hypとの差を求めるステップと、
前記差をキャピラリーの平均電位勾配Eで割るステップと、
を具備することを特徴とするキャピラリーゾーン電気泳動法における仮想的浸透流を用いた電気泳動時間ー実効移動度変換方法。
産業区分
  • 試験、検査
国際特許分類(IPC)
画像

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出願権利状態 権利存続中


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