TOP > 国内特許検索 > p-ニトロフェニル 2-アセチルアミノ-4-O-(2-アミノ-2-デオキシ-β-D -グルコピラノシル)-2-デオキシ-β-D -グルコピラノシドおよびその塩並びにその製造法

p-ニトロフェニル 2-アセチルアミノ-4-O-(2-アミノ-2-デオキシ-β-D -グルコピラノシル)-2-デオキシ-β-D -グルコピラノシドおよびその塩並びにその製造法 新技術説明会

国内特許コード P04A005060
掲載日 2004年11月29日
出願番号 特願平09-156091
公開番号 特開平10-330392
登録番号 特許第3062591号
出願日 平成9年5月30日(1997.5.30)
公開日 平成10年12月15日(1998.12.15)
登録日 平成12年5月12日(2000.5.12)
発明者
  • 徳安 健
  • 小野 裕嗣
  • 亀山 眞由美
  • 森 隆
  • 濱松 潮香
  • 林 清
出願人
  • 国立研究開発法人農業・食品産業技術総合研究機構
発明の名称 p-ニトロフェニル 2-アセチルアミノ-4-O-(2-アミノ-2-デオキシ-β-D -グルコピラノシル)-2-デオキシ-β-D -グルコピラノシドおよびその塩並びにその製造法 新技術説明会
発明の概要 【課題】 エキソ型のキチン分解酵素には作用せず、エンド型のものに対して特異的な基質になり得る化合物およびその製造法を提供すること。
【解決手段】 下記の式(1)で表されるp-ニトロフェニル 2-アセチルアミノ-4-O-(2-アミノ-2-デオキシ-β-D -グルコピラノシル)-2-デオキシ-β-D -グルコピラノシドまたはその酸付加塩並びにキチン2量体のp-ニトロフェニル誘導体に微生物由来の脱アセチル化酵素を作用させることを特徴とするp-ニトロフェニル 2-アセチルアミノ-4-O-(2-アミノ-2-デオキシ-β-D -グルコピラノシル)-2-デオキシ-β-D -グルコピラノシドまたはその酸付加塩の製造法。
【化1】
従来技術、競合技術の概要



キチン分解酵素は、細菌,菌類,植物,節足動物および脊椎動物に広く分布しており、それぞれにおける存在意義の解明および産業への活用を目的とした研究が活発に行われている。一方、キチン分解酵素の活性測定法としては、比濁法,粘度法,放射活性を利用した方法および還元糖定量法等があるが、どの方法も測定に長時間を要したり、手間がかかる等の問題があった。

また、糖鎖工学の発展に伴い、還元末端にp-ニトロフェニル基を有する単糖誘導体を用いる酵素活性測定法が開発され、主にエキソ型の酵素に対する迅速な活性測定法となった。しかしながら、エンド型の酵素に対する活性測定法については、有効な方法が開発されていない。さらに、エンド型の酵素活性を測定することができると考えられたキチンオリゴ糖のp-ニトロフェニル誘導体についても、オリゴ糖を端から順次分解するエキソ型の酵素に対する基質にもなり得ることから、エンド型の酵素に対して特異性の高い基質の開発が待たれている。実際に、エンド型かエキソ型を見分けるのには、反応の進行に伴う粘度の低下速度が速い(エンド型酵素による)、または遅い(エキソ型酵素による)かを調べるというような煩雑な方法がとられている。

産業上の利用分野



本発明は、p-ニトロフェニル 2-アセチルアミノ-4-O-(2-アミノ-2-デオキシ-β-D -グルコピラノシル)-2-デオキシ-β-D -グルコピラノシドおよびその塩、並びにその製造法に関する。本物質は、キチン分解酵素のうち、エキソ型のものには反応せず、エンド型の酵素により分解を受け、呈色性のp-ニトロフェノールを遊離する性質を有している。このことから、本物質は現在市販されている基質と比較して、酵素の分解様式に対する特異性および感度の高い酵素活性測定基質となり得る。

特許請求の範囲 【請求項1】
下記の式(1)で表される-ニトロフェニル 2-アセチルアミノ-4--(2-アミノ-2-デオキシ-β-D -グルコピラノシル)-2-デオキシ-β-D -グルコピラノシドまたはその酸付加塩。
【化1】

【請求項2】

キチン2量体の-ニトロフェニル誘導体にコレトトリカム・リンデムチアナムATCC56676株由来の脱アセチル化酵素を作用させることを特徴とする請求項1記載の-ニトロフェニル 2-アセチルアミノ-4--(2-アミノ-2-デオキシ-β-D -グルコピラノシル)-2-デオキシ-β-D -グルコピラノシドまたはその酸付加塩の製造法。

【請求項3】
キチン2量体の-ニトロフェニル誘導体が、-ニトロフェニル-ジ--アセチル-β-D -キトビオシドである請求項2記載の方法。
国際特許分類(IPC)
Fターム
画像

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JP1997156091thum.jpg
出願権利状態 登録


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