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高い増殖能と分化能を示す正常ヒト肝細胞の長期培養方法

研究報告コード R990003840
掲載日 2001年2月6日
研究者
  • 日野 裕史
  • 立野 知世
  • 佐藤 玄
研究者所属機関
  • 科学技術振興事業団 創造科学技術推進事業
  • 科学技術振興事業団 創造科学技術推進事業
  • 科学技術振興事業団 創造科学技術推進事業
研究機関
  • 科学技術振興事業団 創造科学技術推進事業
報告名称 高い増殖能と分化能を示す正常ヒト肝細胞の長期培養方法
報告概要 成人ヒト肝組織から採取した小型肝細胞と肝非実質細胞を含む画分を,5%ウシ胎児血清,10%正常ヒト血清,50%Swiss3T3細胞の培養上清,表皮成長因子、ニコチンアミド,活性持続型ビタミンC,ジメチルスルホキシドを加えた培地で培養した。正常ヒト血清とSwiss3T3細胞の培養上清がヒト小型肝細胞の増殖の促進に効果的であることを見いだした。小型肝細胞は増殖相で5倍に増加し,およそ35日間ゆっくりと増殖し続けた(図1,図2)。コロニーの細胞は正常肝細胞の表現型,アルブミン,トランスフェリン,サイトケラチン8と18,α1-アンチトリプシンを発現していた。コロニーは3か月間維持することができた。
この研究では,非実質細胞画分に豊富に含まれる高い増殖能を示す小型肝細胞が、ラットと同様,ヒト肝臓にも存在することを明らかにした。
現在の培養条件をいっそう改良することにより,多くの正常ヒト肝細胞が得られ,ハイブリッド型人工肝臓や肝疾患の遺伝子治療に利用できる。
画像

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研究分野
  • 細胞・組織培養法
  • 細胞分裂・増殖
  • 細胞構成体の機能
  • 肝臓
  • 発生と分化
関連発表論文 (1)Tateno C, Yoshizato K. Long-term cultivation of adult rat hepatocytes that undergo multiple cell divisions and express normal parenchymal phenotypes. Am J Pathol 1996; 148: 383-392.
(2)Tateno C, Yoshizato K. Growth and differentiation in culture of clonogenic hepatocytes that express both phenotypes of hepatocytes and biliary epithelial cells. Am J Pathol 1996; 149: 1593-1605.
(3)Hajime Sato, Makoto Funahashi, Dan Bach Kristensen, Chise Tateno, and Katsutoshi Yoshizato, Pleiotrophin as a Swiss 3T3 Cell-Derived Potent Mitogen for Adult Rat Hepatocytes, Experimental Cell Research 246, 152-164 (1999).
(4)Hiroshi Hino, Chise Tateno, Hajime Sato, Chihiro Yamasaki, Shigeru Katayama, Toshihiko Kohashi, Akio Aratani, Toshimasa Asahara, Kiyohiko Dohi, and Katsutoshi Yoshizato, A Long-Term Culture of Human Hepatocytes Which Show a High Growth Potential and Express Their Differentiated Phenotypes
研究制度
  • 創造科学技術推進事業、吉里再生機構プロジェクト/科学技術振興事業団
研究報告資料
  • 日野 裕史,立野 知世,佐藤 玄. 高い増殖能と分化能を示す正常ヒト肝細胞の長期培養方法. 創造科学技術推進事業 吉里再生機構プロジェクト 成果報告集(研究期間:1992-1997),1997. p.285 - 298.

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