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SCREENING METHOD FOR ANTI-OBESITY SUBSTANCE, AND KIT FOR SCREENING FOR ANTI-OBESITY SUBSTANCE

Foreign code F200010156
File No. (S2018-0772-N0)
Posted date Jun 3, 2020
Country WIPO
International application number 2019JP027480
International publication number WO 2020013271
Date of international filing Jul 11, 2019
Date of international publication Jan 16, 2020
Priority data
  • P2018-133627 (Jul 13, 2018) JP
Title SCREENING METHOD FOR ANTI-OBESITY SUBSTANCE, AND KIT FOR SCREENING FOR ANTI-OBESITY SUBSTANCE
Abstract Provided are: a screening method for an anti-obesity substance, the method including selecting a substance capable of increasing the expression of the Pgc-1α gene and the Mipep gene; and a kit for screening that is used in this screening method. During screening, the level of Pgc-1α gene and Mipep gene expression may be determined, and the level of reporter gene expression may be determined by reporter assay.
Outline of related art and contending technology BACKGROUND ART
Obesity, and excess body fat accumulated in the defined state. Is the major cause of obesity, the calorie intake and calorie consumption to the unbalance of the, calorie intake and calorie consumption is greater, the excess calories and fat accumulated in the body, and the obesity eventually. Obesity, diabetes, hypertension, hyperlipidemia and also may cause a lifestyle-related diseases and the like. Thus, improvement and prevention of obesity, to reduce the risk of lifestyle diseases considered to be extremely important.
Incidentally, in recent years, by limiting the calorie intake (caloric restriction; CR), a mitochondrial energy metabolism in the biosynthesis of the relationship to enhance and functions have been reported. For example, in non-patent document 1, limited by the calorie intake (CR), white adipose tissue and selectively dependent Srebp-1c, through biosynthesis Pgc-1α mitochondria have been reported to enhance. In addition, in Non-Patent Document 2, the calorie intake limit of the expression (CR) and by enhancing Mipep, unprocessed Mipep Sirt3 by the active-type are reported.
Scope of claims (In Japanese)[請求項1]
 Pgc-1α遺伝子及びMipep遺伝子の発現を亢進させる物質を選択することを含む抗肥満物質のスクリーニング方法。

[請求項2]
 Pgc-1α遺伝子及びMipep遺伝子を発現する細胞に被験物質を接触させる工程と、
 前記被験物質を接触させない場合に比べて、前記細胞におけるPgc-1α遺伝子及びMipep遺伝子の発現量が増加する場合に、該被験物質を抗肥満物質として選択する工程と、
を含む請求項1に記載の抗肥満物質のスクリーニング方法。

[請求項3]
 前記細胞として、Srebp-1c遺伝子を有する細胞とSrebp-1c遺伝子を有しない細胞とを使用し、
 前記被験物質を接触させることにより、Srebp-1c遺伝子を有する細胞においてのみPgc-1α遺伝子及びMipep遺伝子の発現量が増加する場合に、該被験物質を抗肥満物質として選択する請求項2に記載の抗肥満物質のスクリーニング方法。

[請求項4]
 Pgc-1α遺伝子のプロモーターの下流に機能的に連結された第1のレポーター遺伝子を有する第1の形質転換体、及びMipep遺伝子のプロモーターの下流に機能的に連結された第2のレポーター遺伝子を有する第2の形質転換体に、被験物質を接触させる工程と、
 前記被験物質を接触させない場合に比べて、前記第1のレポーター遺伝子及び前記第2のレポーター遺伝子の発現量が増加する場合に、該被験物質を抗肥満物質として選択する工程と、
を含む請求項1に記載の抗肥満物質のスクリーニング方法。

[請求項5]
 前記第1の形質転換体及び前記第2の形質転換体のそれぞれとして、Srebp-1c遺伝子を有する形質転換体とSrebp-1c遺伝子を有しない形質転換体とを使用し、
 前記被験物質を接触させることにより、Srebp-1c遺伝子を有する形質転換体においてのみ前記第1のレポーター遺伝子及び前記第2のレポーター遺伝子の発現量が増加する場合に、該被験物質を抗肥満物質として選択する請求項4に記載の抗肥満物質のスクリーニング方法。

[請求項6]
 下記(a)~(c)から選択される少なくとも1つを含む抗肥満物質のスクリーニング用キット:
(a)Pgc-1α遺伝子及びMipep遺伝子のそれぞれを増幅するためのプライマー、
(b)Pgc-1α遺伝子及びMipep遺伝子のそれぞれを検出するためのプローブ、
(c)Pgc-1αタンパク質及びMipepタンパク質のそれぞれに対する抗体。

[請求項7]
 下記(d)及び(e)から選択される少なくとも1つを含む抗肥満物質のスクリーニング用キット:
(d)Pgc-1α遺伝子のプロモーターと、該プロモーターの下流に機能的に連結された第1のレポーター遺伝子とを有する第1のベクター、及びMipep遺伝子のプロモーターと、該プロモーターの下流に機能的に連結された第2のレポーター遺伝子とを有する第2のベクター、
(e)Pgc-1α遺伝子のプロモーターの下流に機能的に連結された第1のレポーター遺伝子を有する第1の形質転換体、及びMipep遺伝子のプロモーターの下流に機能的に連結された第2のレポーター遺伝子を有する第2の形質転換体。
  • Applicant
  • ※All designated countries except for US in the data before July 2012
  • TOKYO UNIVERSITY OF SCIENCE FOUNDATION
  • Inventor
  • HIGAMI YOSHIKAZU
  • KOBAYASHI MASAKI
  • NARITA TAKUMI
  • TAKI KANARI
IPC(International Patent Classification)
Specified countries National States: AE AG AL AM AO AT AU AZ BA BB BG BH BN BR BW BY BZ CA CH CL CN CO CR CU CZ DE DJ DK DM DO DZ EC EE EG ES FI GB GD GE GH GM GT HN HR HU ID IL IN IR IS JO JP KE KG KH KN KP KR KW KZ LA LC LK LR LS LU LY MA MD ME MG MK MN MW MX MY MZ NA NG NI NO NZ OM PA PE PG PH PL PT QA RO RS RU RW SA SC SD SE SG SK SL SM ST SV SY TH TJ TM TN TR TT TZ UA UG US UZ VC VN ZA ZM ZW
ARIPO: BW GH GM KE LR LS MW MZ NA RW SD SL SZ TZ UG ZM ZW
EAPO: AM AZ BY KG KZ RU TJ TM
EPO: AL AT BE BG CH CY CZ DE DK EE ES FI FR GB GR HR HU IE IS IT LT LU LV MC MK MT NL NO PL PT RO RS SE SI SK SM TR
OAPI: BF BJ CF CG CI CM GA GN GQ GW KM ML MR NE SN ST TD TG
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