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MICROFLUIDICDEVICE FOR TRAPPING SINGLE CELL

Foreign code F110002745
File No. S2007-1000-C0
Posted date Apr 13, 2011
Country WIPO
International application number 2008JP002058
International publication number WO 2009/016842
Date of international filing Jul 31, 2008
Date of international publication Feb 5, 2009
Priority data
  • P2007-201373 (Aug 1, 2007) JP
Title MICROFLUIDICDEVICE FOR TRAPPING SINGLE CELL
Abstract It is intended to provide a microfluidicdevice whereby a large amount cells in a sample can be highly efficiently isolated and trapped at the single cell level without damaging the cells by using a microfabrication technique. A microfluidicdevice which comprises, in the following order: a top substrate made of a plastic plate having a channel for forming a microchannel connecting a sample inlet to a sample outlet; an upper plastic plate constituting the microchannel together with the above-described top substrate and having an aperture for a micromesh; a holder plate holding a plastic micromesh having a plural number of micro-cavities for trapping cells; a lower plastic plate having an aperture for suction; and a bottom substrate made of a plastic plate having a groove for forming a suction channel, wherein the micro-cavities for capturing cells in the above-described micromesh have an inverted pot shape or a cylindrical shape and the above-described upper plate is made of a plastic material that is softer than the plastic material for the above-described top substrate.
Scope of claims (In Japanese)
【請求項1】マイクロメッシュにより試料中に含まれる細胞を1細胞レベルで捕捉することができるマイクロ流路デバイスであって、表面に試料供給口及び試料排出口が形成され、下面に試料供給口と試料排出口を連通するマイクロ流路形成用の溝が設けられたプラスチック製平板からなる上部基板と、前記上部基板と協働してマイクロ流路を形成するとともに、マイクロ流路の一部に相当する位置にマイクロメッシュ用開口窓が設けられたプラスチック製上部平板と、前記上部平板の開口窓の下方に相当する位置に、細胞捕捉用の複数の微細貫通孔を有するプラスチック製のマイクロメッシュと、該マイクロメッシュを保持する保持板からなるマイクロメッシュ保持平板と、前記保持平板のマイクロメッシュの下方に相当する位置に吸引用開口窓が設けられたプラスチック製下部平板と、表面に吸引口が形成され、上面に前記下部平板と協働して前記吸引用開口窓と吸引口を連通する吸引流路形成用の溝が設けられたプラスチック製平板からなる下部基板と、を順次備え、前記マイクロメッシュの細胞捕捉用の微細貫通孔の形状が反すり鉢状又は円筒状であり、前記上部平板が前記上部基板に比較して軟質のプラスチックで構成されており、前記上部基板と上部平板、又は上部平板とマイクロメッシュ保持平板とが装脱着可能に構成されていることを特徴とするマイクロ流路デバイス。

【請求項2】マイクロメッシュが、PET製又は着色PET製であることを特徴とする請求項1記載のマイクロ流路デバイス。

【請求項3】マイクロメッシュが、1000~10000の微細貫通孔を有することを特徴とする請求項1又は2記載のマイクロ流路デバイス。

【請求項4】上部基板と上部平板が、PDMS(poly-dimethylsiloxisane)を主剤とするプラスチック製であることを特徴とする請求項1~3のいずれか記載のマイクロ流路デバイス。

【請求項5】マイクロ流路内面が非イオン性界面活性剤で処理されていることを特徴とする請求項1~4のいずれか記載のマイクロ流路デバイス。

【請求項6】非イオン性界面活性剤が、ポリオキシエチレン・ポリオキシプロピレンブロックコポリマー型非イオン性界面活性剤であることを特徴とする請求項5記載のマイクロ流路デバイス。

【請求項7】マイクロメッシュを保持する保持板が、ガラス製であることを特徴とする請求項1~6のいずれか記載のマイクロ流路デバイス。

【請求項8】少なくとも、細胞捕捉率が50%以上であることを特徴とする請求項1~7のいずれか記載のマイクロ流路デバイス。

【請求項9】請求項1~8のいずれか記載のマイクロ流路デバイスの試料供給口から細胞を含む試料を注入し、-10kPa~-0.1kPaの吸引圧で吸引することを特徴とする試料中に含まれる細胞を1細胞レベルで捕捉する方法。

【請求項10】請求項1~8のいずれか記載のマイクロ流路デバイスを用いて、試料中に含まれる細胞を1細胞レベルで捕捉し、捕捉された各細胞に蛍光プローブを導入した後、蛍光励起により単一細胞の遺伝子発現を定量的に解析する方法。
  • Applicant
  • ※All designated countries except for US in the data before July 2012
  • NATIONAL UNIVERSITY CORPORATION TOKYO UNIVERSITY OF AGRICULTURE AND TECHNOLOGY
  • Inventor
  • MATSUNAGA, Tadashi
  • ARAKAKI, Atsushi
  • TAGUCHI, Tomoyuki
  • HOSOKAWA, Masahito
IPC(International Patent Classification)
Specified countries AE(UTILITY MODEL),AG,AL(UTILITY MODEL),AM(PROVISIONAL PATENT)(UTILITY MODEL),AO(UTILITY MODEL),AT(UTILITY MODEL),AU,AZ(UTILITY MODEL),BA,BB,BG(UTILITY MODEL),BH(UTILITY MODEL),BR(UTILITY MODEL),BW(UTILITY MODEL),BY(UTILITY MODEL),BZ(UTILITY MODEL),CA,CH,CN(UTILITY MODEL),CO(UTILITY MODEL),CR(UTILITY MODEL),CU(INVENTOR'S CERTIFICATE),CZ(UTILITY MODEL),DE(UTILITY MODEL),DK(UTILITY MODEL),DM(UTILITY MODEL),DO(UTILITY MODEL),DZ,EC(UTILITY MODEL),EE(UTILITY MODEL),EG(UTILITY MODEL),ES(UTILITY MODEL),FI(UTILITY MODEL),GB,GD,GE(UTILITY MODEL),GH(UTILITY CERTIFICATE),GM,GT,HN,HR(CONSENSUAL PATENT),HU(UTILITY MODEL),ID,IL,IN,IS,JP(UTILITY MODEL),KE(UTILITY MODEL),KG(UTILITY MODEL),KM,KN,KP(INVENTOR'S CERTIFICATE)(UTILITY MODEL),KR(UTILITY MODEL),KZ(PROVISIONAL PATENT)(UTILITY MODEL),LA,LC,LK,LR,LS(UTILITY MODEL),LT,LU,LY,MA,MD(UTILITY MODEL),ME(PETTY PATENT),MG,MK,MN,MW,MX(UTILITY MODEL),MY(UTILITY-INNOVATION),MZ(UTILITY MODEL),NA,NG,NI(UTILITY MODEL),NO,NZ,OM(UTILITY MODEL),PG,PH(UTILITY MODEL),PL(UTILITY MODEL),PT(UTILITY MODEL),RO,RS(PETTY PATENT),RU(UTILITY MODEL),SC,SD,SE,SG,SK(UTILITY MODEL),SL(UTILITY MODEL),SM,ST,SV(UTILITY MODEL),SY,TJ(UTILITY MODEL),TM(PROVISIONAL PATENT),TN,TR(UTILITY MODEL),TT(UTILITY CERTIFICATE),TZ,UA(UTILITY MODEL),UG(UTILITY CERTIFICATE),US,UZ(UTILITY MODEL),VC(UTILITY CERTIFICATE),VN(PATENT FOR UTILITY SOLUTION),ZA,ZM,ZW,EP(AT,BE,BG,CH,CY,CZ,DE,DK,EE,ES,FI,FR,GB,GR,HR,HU,IE,IS,IT,LT,LU,LV,MC,MT,NL,NO,PL,PT,RO,SE,SI,SK,TR),OA(BF(UTILITY MODEL),BJ(UTILITY MODEL),CF(UTILITY MODEL),CG(UTILITY MODEL),CI(UTILITY MODEL),CM(UTILITY MODEL),GA(UTILITY MODEL),GN(UTILITY MODEL),GQ(UTILITY MODEL),GW(UTILITY MODEL),ML(UTILITY MODEL),MR(UTILITY MODEL),NE(UTILITY MODEL),SN(UTILITY MODEL),TD(UTILITY MODEL),TG(UTILITY MODEL)),AP(BW(UTILITY MODEL),GH(UTILITY MODEL),GM(UTILITY MODEL),KE(UTILITY MODEL),LS(UTILITY MODEL),MW(UTILITY MODEL),MZ(UTILITY MODEL),NA(UTILITY MODEL),SD(UTILITY MODEL),SL(UTILITY MODEL),SZ(UTILITY MODEL),TZ(UTILITY MODEL),UG(UTILITY MODEL),ZM(UTILITY MODEL),ZW(UTILITY MODEL)),EA(AM,AZ,BY,KG,KZ,MD,RU,TJ,TM)
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