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NOVEL GLYCOSYLTRANSFERASE, NOVEL GLYCOSYLTRANSFERASE GENE, AND NOVEL GLYCOSYL DONOR COMPOUND

Foreign code F110006052
File No. S2009-0294
Posted date Dec 28, 2011
Country WIPO
International application number 2010JP050674
International publication number WO 2011016260
Date of international filing Jan 21, 2010
Date of international publication Feb 10, 2011
Priority data
  • P2009-184030 (Aug 7, 2009) JP
Title NOVEL GLYCOSYLTRANSFERASE, NOVEL GLYCOSYLTRANSFERASE GENE, AND NOVEL GLYCOSYL DONOR COMPOUND
Abstract Disclosed is a glycosyl donor reagent comprising a glycosyl donor compound other than a sugar nucleotide. Also disclosed is an enzyme capable of catalyzing a glycosyltransfer reaction that utilizes a glycosyl donor compound other than a sugar nucleotide. Specifically disclosed is a glycosyl donor reagent comprising a compound represented by formula (A) [wherein R1's are independently selected from a hydrogen atom, a C1-6 alkyl group, a C2-6 alkenyl group and a C2-6 alkynyl group (each of the groups may be unsubstituted or substituted by at least one group selected from a C1-6 alkyl group, a C2-6 alkenyl group, a C2-6 alkynyl group, OH, F, Cl, Br, I, CN, NO2 and SO2); n represents 0, 1, 2, 3, 4 or 5; m represents 0 or 1; and X represents a monosaccharide that is bound via a β-bond at an anomeric carbon]. Also specifically disclosed is a glycosyltransferase capable of catalyzing a glycosyltransfer reaction that utilizes the glycosyl donor. Further specifically disclosed is a glycosyltransferase gene comprising DNA encoding the glycosyltransferase.
Outline of related art and contending technology BACKGROUND ART
In general, a compound which is obtained by saccharifying distribution glycated compound distribution, the compounds of the pretreated material for saccharification distribution than to have a high stability and solubility. Therefore different compounds for saccharizing the distribution glycosyltransfer reaction has been actively conducted. In addition, glycosyltransfer reaction is a sugar chain and thus may be applied to such synthesis, has been attracting attention as one of the research topic.
Found in the natural world as one of the glycosyltransfer reaction, the color of the petals or fruits of a plant is involved in the expression of known. Patent Document 1 is for example, ivy-leaved momingglory gene derived from other plant sugars incorporated into the 3 position of a flavonoid sugar can be glucose in transition, and has a different color from natural vegetable and flowers as described is a method in which.
Glycosyltransfer reaction as is, nucleotides UDP - sugars such as glucose is often used as a sugar donor known. For example, the non-patent document 1, shiso, derived from verbena UDP - glucose: anthocyanidin glycosyltransferase is 5 -, UDP - glucose as a sugar donor, sugar to a hydroxy group at position 5 of the anthocyanidins transfer to catalyze the reaction described. Non-patent document 2 is, shiso, corn, disorder, derived from grape UDP - glucose: flavonoid glycosyltransferase is 3 -, UDP - glucose as a sugar donor, to a hydroxy group at position 3 of the flavonoid or anthocyanidin transfer to reaction as the sugar is described. Is Patent Document 2, the enzyme is derived from snapdragon, UDP - glucose as a sugar donor, chalcones of the 4' position of the sugar to a hydroxy group transfer to catalyze the reaction described. In the above-mentioned Patent Document 1, incorporating the glycosyltransferase is encoded by the gene, as a sugar donor UDP - glucose, glucose transfer to the catalyst to catalyze a reaction (see Patent Document 1 embodiment 4).
Scope of claims (In Japanese)請求の範囲 [請求項1]
 以下の(a)または(b)のタンパク質:
(a)配列番号1または3に記載のアミノ酸配列からなるタンパク質、
(b)配列番号1または3に記載のアミノ酸配列において1個または数個のアミノ酸が欠失、置換、挿入もしくは付加されたアミノ酸配列からなり、かつ糖転移酵素活性を有するタンパク質。

[請求項2]
 請求項1に記載のタンパク質をコードするDNAからなる糖転移酵素遺伝子。

[請求項3]
 以下の(c)~(e)のいずれかのDNAからなる糖転移酵素遺伝子:
(c)配列番号2または4に記載の塩基配列からなるDNA、
(d)配列番号2または4に記載の塩基配列と相補的な塩基配列からなるDNAとストリンジェントな条件下でハイブリダイズし、かつ糖転移酵素活性を有するタンパク質をコードするDNA、
(e)配列番号2または4に記載の塩基配列の縮重異性体からなるDNA。

[請求項4]
 請求項2または3に記載の糖転移酵素遺伝子を含む組換えベクター。

[請求項5]
 請求項4に記載の組換えベクターを用いて宿主細胞を形質転換して得られる形質転換体。

[請求項6]
 請求項2または3に記載の糖転移酵素遺伝子が導入された植物もしくはこれと同じ性質を有する該植物の子孫。

[請求項7]
 請求項5に記載の形質転換体を培養することを含む、請求項1に記載の糖転移酵素の製造方法。

[請求項8]
 式(A):
[化1]

[式中、R 1はそれぞれ独立して水素、またはC 1-6アルキル、C 2-6アルケニルもしくはC 2-6アルキニル(これらの基は、非置換であるか、あるいはOH、F、Cl、Br、I、CN、NO 2もしくはSO 2から選択される1個以上の基によって置換されていてもよい)から選択され、
 nは0、1、2、3、4または5であり、
 mは0または1であり、
 Xは、アノマー炭素においてβ結合している単糖である]
で表される化合物を含む糖供与試薬。

[請求項9]
 R 1がそれぞれ独立して水素またはC 1-6アルキル(C 1-6アルキルは非置換であるか、あるいはOH、F、Cl、BrもしくはIから選択される1個以上の基によって置換されていてもよい)から選択される、請求項8に記載の糖供与試薬。

[請求項10]
 Xがグルコース、グルクロン酸、ガラクトース、キシロース、アピオース、アロース、ラムノース、アラビノフラノースもしくはマンノースから選択される、請求項8または9に記載の糖供与試薬。

[請求項11]
 式(A)で表される化合物がバニリン酸1-O-βグルコース、イソバニリン酸1-O-βグルコース、p-ヒドロキシ安息香酸1-O-βグルコース、p-クマル酸1-O-βグルコース、カフェ酸1-O-βグルコース、フェルラ酸1-O-βグルコースまたはシナピン酸1-O-βグルコースである、請求項10に記載の糖供与試薬。

[請求項12]
 ポリフェノールに請求項8~11のいずれか1項に記載の糖供与試薬と糖転移酵素を反応させることを含む、ポリフェノールの配糖化方法。

[請求項13]
 ポリフェノールがフラボノイドである、請求項12に記載の配糖化方法。

[請求項14]
 糖転移酵素が赤色ではない花弁を有するカーネーション由来あるいはデルフィニウム由来である、請求項12または13に記載の配糖化方法。

[請求項15]
 糖転移酵素が請求項1に記載のタンパク質である、請求項12または13に記載の配糖化方法。

[請求項16]
 請求項8~11のいずれか1項に記載の糖供与試薬と請求項1に記載のタンパク質とを含む、ポリフェノール配糖化キット。

  • Applicant
  • ※All designated countries except for US in the data before July 2012
  • NATIONAL UNIVERSITY CORPORATION TOKYO UNIVERSITY OF AGRICULTURE AND TECHNOLOGY
  • Inventor
  • OZEKI Yoshihiro
  • SASAKI Nobuhiro
  • NAGASAWA Kazuo
  • TERA Masayuki
  • MATSUBA Yuki
  • NAKAMURA Haruka
  • ABE Yutaka
IPC(International Patent Classification)
Specified countries National States: AE AG AL AM AO AT AU AZ BA BB BG BH BR BW BY BZ CA CH CL CN CO CR CU CZ DE DK DM DO DZ EC EE EG ES FI GB GD GE GH GM GT HN HR HU ID IL IN IS JP KE KG KM KN KP KR KZ LA LC LK LR LS LT LU LY MA MD ME MG MK MN MW MX MY MZ NA NG NI NO NZ OM PE PG PH PL PT RO RS RU SC SD SE SG SK SL SM ST SV SY TH TJ TM TN TR TT TZ UA UG US UZ VC VN ZA ZM ZW
ARIPO: BW GH GM KE LS MW MZ NA SD SL SZ TZ UG ZM ZW
EAPO: AM AZ BY KG KZ MD RU TJ TM
EPO: AT BE BG CH CY CZ DE DK EE ES FI FR GB GR HR HU IE IS IT LT LU LV MC MK MT NL NO PL PT RO SE SI SK SM TR
OAPI: BF BJ CF CG CI CM GA GN GQ GW ML MR NE SN TD TG
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