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METHOD FOR PRODUCING PANCREATIC ENDOCRINE CELLS, AND TRANSDIFFERENTIATION AGENT

Foreign code F170009294
File No. S2015-1882-C0
Posted date Nov 21, 2017
Country WIPO
International application number 2016JP082095
International publication number WO 2017073740
Date of international filing Oct 28, 2016
Date of international publication May 4, 2017
Priority data
  • P2015-212563 (Oct 29, 2015) JP
Title METHOD FOR PRODUCING PANCREATIC ENDOCRINE CELLS, AND TRANSDIFFERENTIATION AGENT
Abstract A method for producing pancreatic endocrine cells, said method comprising an introduction step in which any of the following genes or gene products are introduced into somatic cells: (A) a mutant GLIS1 gene or gene product thereof having at least 85% sequence identity with the nucleic acid sequence represented by SEQ. ID No. 1 or 2, a Neurogenin-3 gene or gene product thereof, a Pdx1 gene or gene product thereof, and a MafA gene or gene product thereof; (B) a mutant GLIS1 gene or gene product thereof having at least 85% sequence identity with the nucleic acid sequence represented by SEQ. ID No. 1 or 2, a Neurogenin-3 gene or gene product thereof, and a Pdx1 gene or gene product thereof; (C) a GLIS1 gene or gene product thereof, a Neurogenin-3 gene or gene product thereof, a Pdx1 gene or gene product thereof, and a MafA gene or gene product thereof; and (D) a mutant GLIS1 gene or gene product thereof having at least 85% sequence identity with the nucleic acid sequence represented by SEQ. ID No. 1 or 2, a Neurogenin-3 gene or gene product thereof, and a MafA gene or gene product thereof.
Outline of related art and contending technology BACKGROUND ART
Of the endocrine pancreas cells, as the material of the regenerative medical treatment of diabetes, in addition, the treatment of diabetes mellitus such as the material used for the screening of drugs that can be used as expected. The method from the viewpoint of regenerative medicine, for example, insulin is insufficient to type Il diabetes I, 1 and one of the endocrine pancreas cells, β cells produce insulin which is expected to be administered. Therefore, the endocrine pancreas cells, in vitro prepared in large quantities is a strong demand for the development.
So far, embryonic stem cells (embryonic stem cell, or less, 'ES cells' referred to), or an induced pluripotent stem cell (induced pluripotent stem cell, or less, ' iPS cells' referred to) using a method of producing β cells have been proposed. However, in the methods, cell culture medium for the various developmental differentiation inhibitor related to and necessary to adjust a culture environment by providing an additional, complicated and, further, reproducibility can be obtained also a problem that is not. In addition, in the methods, can also be produced by cells other than β from, is also a problem in terms of efficiency. Further, to obtain the β cells, required to be at least 21-30- date, can be manufactured in a short time is also a problem that not.
Thus, reproduction is easy and convenient, excellent production efficiency, can be manufactured in a short time and the manufacturing method of the cells of the endocrine pancreas is a strong demand to provide a rapid change in the current situation.
In addition, is GLIS1 (GLIS family zinc finger 1), to improve efficiency in the establishment of improved iPS is known (for example, see Patent Document 1). However, the GLIS1, not through the stem cells, somatic cells of the endocrine pancreas cells directly convert is involved in, is not known at all.
Scope of claims (In Japanese)[請求項1]
下記(A)から(D)のいずれかの遺伝子乃至その遺伝子産物を体細胞に導入する導入工程を含むことを特徴とする膵内分泌細胞の製造方法。
(A)配列番号:1及び2のいずれかで表される塩基配列と85%以上の配列同一性を有する変異GLIS1遺伝子乃至その遺伝子産物、Neurogenin3遺伝子乃至その遺伝子産物、Pdx1遺伝子乃至その遺伝子産物、及びMafA遺伝子乃至その遺伝子産物。
(B)配列番号:1及び2のいずれかで表される塩基配列と85%以上の配列同一性を有する変異GLIS1遺伝子乃至その遺伝子産物、Neurogenin3遺伝子乃至その遺伝子産物、及びPdx1遺伝子乃至その遺伝子産物。
(C)GLIS1遺伝子乃至その遺伝子産物、Neurogenin3遺伝子乃至その遺伝子産物、Pdx1遺伝子乃至その遺伝子産物、及びMafA遺伝子乃至その遺伝子産物。
(D)配列番号:1及び2のいずれかで表される塩基配列と85%以上の配列同一性を有する変異GLIS1遺伝子乃至その遺伝子産物、Neurogenin3遺伝子乃至その遺伝子産物、及びMafA遺伝子乃至その遺伝子産物。
[請求項2]
前記導入工程で体細胞に導入する前記(A)から(D)のいずれかの遺伝子乃至その遺伝子産物が、(A)配列番号:1及び2のいずれかで表される塩基配列と85%以上の配列同一性を有する変異GLIS1遺伝子乃至その遺伝子産物、Neurogenin3遺伝子乃至その遺伝子産物、Pdx1遺伝子乃至その遺伝子産物、及びMafA遺伝子乃至その遺伝子産物である請求項1に記載の膵内分泌細胞の製造方法。
[請求項3]
前記導入工程で体細胞に導入する前記(A)から(D)のいずれかの遺伝子乃至その遺伝子産物が、(B)配列番号:1及び2のいずれかで表される塩基配列と85%以上の配列同一性を有する変異GLIS1遺伝子乃至その遺伝子産物、Neurogenin3遺伝子乃至その遺伝子産物、及びPdx1遺伝子乃至その遺伝子産物である請求項1に記載の膵内分泌細胞の製造方法。
[請求項4]
前記導入工程で体細胞に導入する前記(A)から(D)のいずれかの遺伝子乃至その遺伝子産物が、(C)GLIS1遺伝子乃至その遺伝子産物、Neurogenin3遺伝子乃至その遺伝子産物、Pdx1遺伝子乃至その遺伝子産物、及びMafA遺伝子乃至その遺伝子産物である請求項1に記載の膵内分泌細胞の製造方法。
[請求項5]
前記導入工程で体細胞に導入する前記(A)から(D)のいずれかの遺伝子乃至その遺伝子産物が、(D)配列番号:1及び2のいずれかで表される塩基配列と85%以上の配列同一性を有する変異GLIS1遺伝子乃至その遺伝子産物、Neurogenin3遺伝子乃至その遺伝子産物、及びMafA遺伝子乃至その遺伝子産物である請求項1に記載の膵内分泌細胞の製造方法。
[請求項6]
前記体細胞が、線維芽細胞及び間葉系幹細胞のいずれかである請求項1から5のいずれかに記載の膵内分泌細胞の製造方法。
[請求項7]
膵内分泌細胞が、β細胞である請求項1から6のいずれかに記載の膵内分泌細胞の製造方法。
[請求項8]
体細胞を膵内分泌細胞へ分化転換する分化転換剤であって、
下記(A)から(D)のいずれかの遺伝子乃至その遺伝子産物を含むことを特徴とする分化転換剤。
(A)配列番号:1及び2のいずれかで表される塩基配列と85%以上の配列同一性を有する変異GLIS1遺伝子乃至その遺伝子産物、Neurogenin3遺伝子乃至その遺伝子産物、Pdx1遺伝子乃至その遺伝子産物、及びMafA遺伝子乃至その遺伝子産物。
(B)配列番号:1及び2のいずれかで表される塩基配列と85%以上の配列同一性を有する変異GLIS1遺伝子乃至その遺伝子産物、Neurogenin3遺伝子乃至その遺伝子産物、及びPdx1遺伝子乃至その遺伝子産物。
(C)GLIS1遺伝子乃至その遺伝子産物、Neurogenin3遺伝子乃至その遺伝子産物、Pdx1遺伝子乃至その遺伝子産物、及びMafA遺伝子乃至その遺伝子産物。
(D)配列番号:1及び2のいずれかで表される塩基配列と85%以上の配列同一性を有する変異GLIS1遺伝子乃至その遺伝子産物、Neurogenin3遺伝子乃至その遺伝子産物、及びMafA遺伝子乃至その遺伝子産物。
[請求項9]
前記(A)から(D)のいずれかの遺伝子乃至その遺伝子産物が、(A)配列番号:1及び2のいずれかで表される塩基配列と85%以上の配列同一性を有する変異GLIS1遺伝子乃至その遺伝子産物、Neurogenin3遺伝子乃至その遺伝子産物、Pdx1遺伝子乃至その遺伝子産物、及びMafA遺伝子乃至その遺伝子産物である請求項8に記載の分化転換剤。
[請求項10]
前記(A)から(D)のいずれかの遺伝子乃至その遺伝子産物が、(B)配列番号:1及び2のいずれかで表される塩基配列と85%以上の配列同一性を有する変異GLIS1遺伝子乃至その遺伝子産物、Neurogenin3遺伝子乃至その遺伝子産物、及びPdx1遺伝子乃至その遺伝子産物である請求項8に記載の分化転換剤。
[請求項11]
前記(A)から(D)のいずれかの遺伝子乃至その遺伝子産物が、(C)GLIS1遺伝子乃至その遺伝子産物、Neurogenin3遺伝子乃至その遺伝子産物、Pdx1遺伝子乃至その遺伝子産物、及びMafA遺伝子乃至その遺伝子産物である請求項8に記載の分化転換剤。
[請求項12]
前記(A)から(D)のいずれかの遺伝子乃至その遺伝子産物が、(D)配列番号:1及び2のいずれかで表される塩基配列と85%以上の配列同一性を有する変異GLIS1遺伝子乃至その遺伝子産物、Neurogenin3遺伝子乃至その遺伝子産物、及びMafA遺伝子乃至その遺伝子産物である請求項8に記載の分化転換剤。
[請求項13]
前記体細胞が、線維芽細胞及び間葉系幹細胞のいずれかである請求項8から12のいずれかに記載の分化転換剤。
[請求項14]
膵内分泌細胞が、β細胞である請求項8から13のいずれかに記載の分化転換剤。
  • Applicant
  • ※All designated countries except for US in the data before July 2012
  • SAITAMA MEDICAL UNIVERSITY
  • Inventor
  • MATSUMOTO, Masahito
  • OKAZAKI, Yasushi
  • SUGAHARA, Izumi
IPC(International Patent Classification)
Specified countries National States: AE AG AL AM AO AT AU AZ BA BB BG BH BN BR BW BY BZ CA CH CL CN CO CR CU CZ DE DJ DK DM DO DZ EC EE EG ES FI GB GD GE GH GM GT HN HR HU ID IL IN IR IS JP KE KG KN KP KR KW KZ LA LC LK LR LS LU LY MA MD ME MG MK MN MW MX MY MZ NA NG NI NO NZ OM PA PE PG PH PL PT QA RO RS RU RW SA SC SD SE SG SK SL SM ST SV SY TH TJ TM TN TR TT TZ UA UG US UZ VC VN ZA ZM ZW
ARIPO: BW GH GM KE LR LS MW MZ NA RW SD SL SZ TZ UG ZM ZW
EAPO: AM AZ BY KG KZ RU TJ TM
EPO: AL AT BE BG CH CY CZ DE DK EE ES FI FR GB GR HR HU IE IS IT LT LU LV MC MK MT NL NO PL PT RO RS SE SI SK SM TR
OAPI: BF BJ CF CG CI CM GA GN GQ GW KM ML MR NE SN ST TD TG

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