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METHOD FOR IMPROVING ACTIVITY OF PET-DEGRADING ENZYME USING ADDITIVE

Foreign code F180009563
File No. S2017-0504-C0
Posted date Nov 5, 2018
Country WIPO
International application number 2018JP009170
International publication number WO 2018168679
Date of international filing Mar 9, 2018
Date of international publication Sep 20, 2018
Priority data
  • P2017-049198 (Mar 14, 2017) JP
Title METHOD FOR IMPROVING ACTIVITY OF PET-DEGRADING ENZYME USING ADDITIVE
Abstract Provided are a method and a reagent for improving the activity of PETase. In this method, when making the PETase of (a) or (b) act on PET to decompose the PET, a surfactant is added to improve the activity of the PETase: (a) an aromatic polyester-degrading enzyme containing an amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 2 or 4 in the sequence listing; or (b) an aromatic polyester-degrading enzyme containing an amino acid sequence in which one or several amino acids in the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 2 or 4 in the sequence listing are deleted, substituted, or added, and having an aromatic polyester-degrading activity.
Outline of related art and contending technology BACKGROUND ART
PET resin, high transparency and excellent strength, such as bottles has been widely used. However, because it is stable because there is no degradation of the natural world, the problem occurred due to dust. Hence, recycling is performed so that, at the present time has been performed widely because a chemical recycling.
Typically by chemical hydrolysis of the recycling is, the PET 150 °C.-250 ° C. and excess water to the catalyst at elevated temperatures in ethylene glycol and terephthalic acid (TPA) processing (EG) are polymerized in solution. Hydrolysis catalyst such as sulfuric acid, or a base such as sodium hydroxide is used. However, the chemical recycling is, the problem of the waste liquid treatment.
These PET without imposing a load on the environment used in the aim of processing, carries out the search of the degrading bacteria PET, PET to completely decompose the carbon dioxide and water to the separation of the strain (strain No.201-F6) was successful and reported (see Patent Document 1), further the strain from the strain No.201-F6, and isolated PETase (Patent Document 2 and Non-Patent Document 1 referred to).
However, when used alone PETase, progress of degradation of the PET, and its efficiency is not sufficient.
Scope of claims (In Japanese)請求の範囲
[請求項1]
 以下の(a)又は(b)のPETaseをPETに作用させPETを分解するときに、界面活性剤を添加してPETase活性を向上させる方法:
(a) 配列表の配列番号2又は4に表されるアミノ酸配列からなる芳香族ポリエステル分解酵素;又は
(b) 配列表の配列番号2又は4に表されるアミノ酸配列において、1若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸配列からなり、芳香族ポリエステル分解活性を有する芳香族ポリエステル分解酵素。
[請求項2]
 界面活性剤が、アルキル硫酸塩、アルカンスルホン酸塩、及びポリオキシエチレンアルキルフェニルエーテルからなる群から選択される請求項1記載の方法。
[請求項3]
 界面活性剤が炭素数5~30のアルキルを有するアルキル硫酸ナトリウム又は炭素数5~30のアルカンを有するアルカンスルホン酸ナトリウムである、請求項2記載の方法。
[請求項4]
 界面活性剤がポリオキシエチレンオクチルフェニルエーテル又はポリオキシエチレンノニルフェニルエーテルである、請求項2記載の方法。
[請求項5]
 PETに界面活性剤を添加し、一定時間後にPETaseを添加する、請求項1~4のいずれか1項に記載の方法。
[請求項6]
 PETに界面活性剤とPETaseを同時に添加する、請求項1~4のいずれか1項に記載の方法。
[請求項7]
 以下の(a)又は(b)のPETaseと界面活性剤を含む、PETase活性を向上させるPET分解用試薬組成物キット:
(a) 配列表の配列番号2又は4に表されるアミノ酸配列からなる芳香族ポリエステル分解酵素;又は
(b) 配列表の配列番号2又は4に表されるアミノ酸配列において、1若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸配列からなり、芳香族ポリエステル分解活性を有する芳香族ポリエステル分解酵素。
[請求項8]
 界面活性剤が、アルキル硫酸塩、アルカンスルホン酸塩、及びポリオキシエチレンアルキルフェニルエーテルからなる群から選択される請求項7記載の試薬組成物キット。
[請求項9]
 界面活性剤が炭素数5~30のアルキルを有するアルキル硫酸ナトリウム又は炭素数5~30のアルカンを有するアルカンスルホン酸ナトリウムである、請求項8記載の試薬組成物キット。
[請求項10]
 界面活性剤がポリオキシエチレンオクチルフェニルエーテル又はポリオキシエチレンノニルフェニルエーテルである、請求項8記載の試薬組成物キット。
[請求項11]
 PETaseと界面活性剤を混合して含む、請求項7~10のいずれか1項に記載の試薬組成物キット。
[請求項12]
 PETaseと界面活性剤を別々に含む、請求項7~10のいずれか1項に記載の試薬組成物キット。
  • Applicant
  • ※All designated countries except for US in the data before July 2012
  • KEIO UNIVERSITY
  • Inventor
  • MIYAMOTO Kenji
  • FURUKAWA Makoto
  • KAWAKAMI Norifumi
  • ODA Kohei
IPC(International Patent Classification)
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