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METHOD FOR INJECTING OR TRANSFERRING TRACE OF VARIOUS SAMPLE meetings

Patent code P07A012466
File No. ID5089
Posted date Dec 28, 2007
Application number P2005-042885
Publication number P2006-224034A
Patent number P3978500
Date of filing Feb 18, 2005
Date of publication of application Aug 31, 2006
Date of registration Jul 6, 2007
Inventor
  • (In Japanese)西垣 功一
  • (In Japanese)田山 貴紘
  • (In Japanese)木下 保則
  • (In Japanese)内田 秀和
Applicant
  • (In Japanese)国立大学法人埼玉大学
Title METHOD FOR INJECTING OR TRANSFERRING TRACE OF VARIOUS SAMPLE meetings
Abstract PROBLEM TO BE SOLVED: To provide a method for filling a solution such as a reactive liquid easily in a vessel (well) even when there are vessels (wells) of the number exceeding 1,000 or even when the size, shape and surface state of the vessel (well) do not allow the solution to flow in the vessel (well).
SOLUTION: A method for injecting the solution into the well of a multi-well plate composed of a substrate having a plurality of wells comprises the steps of: putting the solution on the main surface of the multi-well plate on which there is the well having the size, shape and surface state which do not allow the solution to be injected into the well even when the multi-well plate is left standing while keeping an opening of the well upward and the opening of the well is covered with the solution; and exerting centrifugal force on the well in the direction from the opening to the bottom thereof to inject the solution into the well. A method for transferring the solution from the well of one multi-well plate to the well of the other multi-well plate is also provided.
Outline of related art and contending technology (In Japanese)


多種(例えば、1000以上)、微量(例えば、サブナノリットル)試料をプレートに塗布もしくは結合させて並べ、同時に同一処理を行うマイクロプレートとしては、実用化されている。一方、個々の試料を個別のビーズに結合し、操作する方式(on-beads法)も開発されている。



しかし、従来の方式では、プレートに試料を塗布するための特別な装置(マイクロプロッターやマイクロディスペンサー)を必要とし、その操作にも手間と時間がかかった。また、そのように塗布したものを反応させるには通常、一定の反応条件のみが可能で、異なる反応条件に移すとしても、すべての試料を同一の反応条件に曝すことになり、1000を越える多種の試料について、異なる段階の反応を行ったり、それらすべてを個々に異なる反応条件にさらすということはできなかった。一方、ビーズを用い、そこに個別の試料を結合し操作する方式(on-beads法)もあるが、従来これらのビーズを個々に分けて(空間分離し)、操作することはなかった。その理由は個別に分離する操作に特別な装置の開発が必要であり、それらの装置を用いても分離・配置に手間がかかったし、その後の処理も容易な方式(すなわち、同時並列・迅速に試料を移行させる方式)が提案されていなかった。1000を越える異なる反応条件を作成する簡便な方式も考案されていなかった。



一方、多数の(マルチ)マイクロウェルを有する基板(プレート)で、例えば、PCRのような生化学反応を同時に行うことが良く知られている(特開平5-317030号公報(特許文献1))。そして、マイクロウェルの容量をより小さくし、尚且つ良好に反応を進行させるための改良もなされている(WO2002/025289(特許文献2))。しかるに、従来のマルチマイクロウェルを用いた方法や装置では、他種類の試料について、同時に反応は行うが、各反応の条件は同一であり、個々のウェルの反応条件を個別にコントロールすることは行われていない。

Field of industrial application (In Japanese)


本発明は、多種の微量液体試料の容器への同時並列的注入、移行方法に関する。特に本発明は、進化工学、製薬、食品、バイオベンチャ、臨床検査機関、化合物質毒性検査機関などにおいて、多種の微量液体試料を反応させる際に必要となる、試料の分取を同時並列に行うことができる方法に関する。

Scope of claims (In Japanese)
【請求項1】
 
少なくとも一方の主表面に複数のウェルを有する基板からなるマルチウエルプレートのウェル内に溶液を注入する方法であって、
前記ウェルは、前記ウェルの開口が上向きの状態で、マルチウエルプレートを静置したときには、前記ウェルの開口が前記溶液で覆われても、ウェル内に溶液は注入されない、寸法、形状および表面状態を有し、
前記マルチウエルプレートの前記ウェルを有する主表面上に溶液を置き、ウェルの開口から底の向に、遠心力を与えて前記溶液を前記ウェル内に注入する、
前記方法。

【請求項2】
 
前記遠心力が10g以上である請求項1~5のいずれか1項に記載の方法。

【請求項3】
 
前記ウェルの開口の最大内径が、5mm以下である請求項1に記載の方法。

【請求項4】
 
前記遠心力が20g以上である請求項3に記載の方法。

【請求項5】
 
前記ウェルの開口の最大内径が、1mm以下である請求項1に記載の方法。

【請求項6】
 
前記遠心力が100g以上である請求項5に記載の方法。

【請求項7】
 
前記ウェルの内容量が、10μl以下である請求項1~6のいずれか1項に記載の方法。

【請求項8】
 
前記ウェルの内容量が、1μl以下である請求項1~6のいずれか1項に記載の方法。

【請求項9】
 
前記マルチウエルプレートは、1000個以上のウェルを有する請求項1~8のいずれか1項に記載の方法。

【請求項10】
 
複数の開口を有するフィルターを、前記主表面上に置き、さらにこのフィルター上に溶液を置き、ウェルの開口から底の向に遠心力を与えて、前記フィルターの開口を介して、前記溶液を前記ウェル内に注入する、請求項1~9のいずれか1項に記載の方法。

【請求項11】
 
前記フィルターを介して、前記複数のウェルの一部のウェル内に溶液を注入する請求項10に記載の方法。

【請求項12】
 
少なくとも一方の主表面に複数のウェルを有する基板からなるマルチウエルプレート(1)のウェル内に、少なくとも一方の主表面に複数のウェルを有する基板からなるマルチウエルプレート(2)の少なくとも一部のウェルから、このウェル内に格納された溶液の少なくとも一部を移行させる方法であって、
前記マルチウエルプレート(1)のウェルは、前記ウェルの開口が上向きの状態で、マルチウエルプレート(1)を静置したときには、前記ウェルの開口が前記溶液で覆われても、ウェル内に溶液は注入されない、寸法、形状および表面状態を有し、
前記マルチウエルプレート(2)のウェルは、前記ウェルの開口が下向きの状態で、マルチウエルプレート(2)を静置したときに、前記ウェル内の溶液が、ウェルから流出しない、寸法、形状および表面状態を有し、
前記マルチウエルプレート(1)とマルチウエルプレート(2)とを、両プレートが有する少なくとも一部のウェル同士が対向するように固定し、前記マルチウエルプレート(1)のウェルの開口から底の向に、遠心力を与えて前記マルチウエルプレート(2)のウェル内の溶液を前記マルチウエルプレート(1)のウェル内に注入する、前記方法。

【請求項13】
 
複数の開口を有するフィルターを、前記マルチウエルプレート(1)とマルチウエルプレート(2)との間に置き、マルチウエルプレート(1)のウェルの開口から底の向に遠心力を与えて、前記フィルターの開口を介して、前記溶液の移行を行う、請求項12に記載の方法。

【請求項14】
 
前記フィルターを介して、前記複数のウェルの一部のウェル内に溶液を移行させる請求項13に記載の方法。

【請求項15】
 
前記マルチウエルプレート(1)のウェルとマルチウエルプレート(2)のウェルの開口寸法および形状、ならびに配列が、同一である請求項12~14のいずれか1項に記載の方法。

【請求項16】
 
前記マルチウエルプレート(1)のウェルとマルチウエルプレート(2)のウェルの開口寸法および形状、容量ならびに配列の少なくとも一部が相違する請求項12~14のいずれか1項に記載の方法。

【請求項17】
 
前記遠心力が100g以上である請求項12~16のいずれか1項に記載の方法。
IPC(International Patent Classification)
F-term
Drawing

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JP2005042885thum.jpg
State of application right Registered
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