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CELL AGGREGATE INDUCTION PEPTIDE AND METHOD FOR FORMING CELL AGGREGATE USING THE CELL AGGREGATE INDUCTION PEPTIDE meetings achieved

Patent code P100000425
Posted date Nov 20, 2009
Application number P2009-168070
Publication number P2011-020961A
Patent number P5498734
Date of filing Jul 16, 2009
Date of publication of application Feb 3, 2011
Date of registration Mar 14, 2014
Inventor
  • (In Japanese)平野 義明
Applicant
  • (In Japanese)学校法人 関西大学
Title CELL AGGREGATE INDUCTION PEPTIDE AND METHOD FOR FORMING CELL AGGREGATE USING THE CELL AGGREGATE INDUCTION PEPTIDE meetings achieved
Abstract PROBLEM TO BE SOLVED: To provide a cell aggregate induction peptide formable of a cell aggregate by mere addition to a cell culture system and a method for forming a cell aggregate using the cell aggregate induction peptide.
SOLUTION: The cell aggregate induction peptide includes lysine and proline as a constituting repeating unit represented by formula (1): (Lys-Pro)n(wherein n is an integer of 9-30).
Outline of related art and contending technology (In Japanese)



一般に、ディッシュやマルチウェルプレート等の一般的な培養容器を使用して細胞を培養する場合、細胞は容器表面に接着・伸展し、敷石状に増殖するが、そのような培養方法では基材からの影響や細胞間のインタラクションが不足することによって、本来その細胞が生体内において有している機能を発現しない場合がある。その様な機能を発現させるために、三次元培養と呼ばれる、細胞をより生体内に近い凝集塊(スフェロイド)の状態にして培養する方法が知られている。





従来、このような三次元培養により細胞凝集塊を誘導する技術としては、下記非特許文献1に記載されているように、ハンギングドロップ法、容器底部の非接着表面を用いた方法、旋回培養法、3次元スカフォールド法、遠心法等が採用されている。ハンギングドロップ法は、水滴状に垂れ下げた培養液の中で細胞を培養する方法であり、マルチウェルプレート等の蓋の各ウェル上に細胞を含む培養懸濁液を液滴となるようにスポッティングし、マルチウェルプレートにかぶせて培養する方法である。このようなハンギングドロップ法は、たとえば下記非特許文献2、3等に記載されている。





また、容器底部の非接着表面を用いた方法は、培養ディッシュ等の容器底部に超親水性処理を施して非接着表面とする技術であり、そのような技術として、たとえば下記特許文献1のような特許出願がなされている。





その他、旋回培養法、3次元スカフォールド法、遠心法等の方法も採用されているが、上記ハンギングドロップ法や容器底部の非接着表面を用いた方法も含め、これら各種の方法は、いずれも物理的な手法であるため、細胞凝集塊の作成方法の検討や、細胞凝集塊の大きさ等をコントロールすることが困難であった。いずれにしても、化学物質を添加するだけで細胞凝集塊を作成する手法は未だに見出されていない。

Field of industrial application (In Japanese)



本発明は、細胞凝集塊誘導ペプチド、及びその細胞凝集塊誘導用ペプチドを用いた細胞凝集塊の形成方法に関する。

Scope of claims (In Japanese)
【請求項1】
 
Lys-Proを構成繰り返し単位とする重合度が8のペプチド、9のペプチド、10のペプチド、11のペプチド、12のペプチド、13のペプチド、14のペプチド、15のペプチド、及び16のペプチドの混合物であることを特徴とする細胞凝集塊誘導用ペプチド。

【請求項2】
 
請求項1記載の細胞凝集塊誘導用ペプチドを、培養細胞の培地に添加して細胞凝集塊を形成することを特徴とする細胞凝集塊の形成方法。
IPC(International Patent Classification)
F-term
State of application right Registered
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