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VARIANT BACTERIA BELONGING TO GENUS BACILLUS

Patent code P110002331
File No. 00043
Posted date Apr 13, 2011
Application number P2009-195857
Publication number P2011-045281A
Patent number P5474448
Date of filing Aug 26, 2009
Date of publication of application Mar 10, 2011
Date of registration Feb 14, 2014
Inventor
  • (In Japanese)河村 富士夫
  • (In Japanese)七宮 英晃
  • (In Japanese)劉 生浩
  • (In Japanese)荒 勝俊
Applicant
  • (In Japanese)花王株式会社
  • (In Japanese)学校法人立教学院
Title VARIANT BACTERIA BELONGING TO GENUS BACILLUS
Abstract PROBLEM TO BE SOLVED: To provide a variant bacteria belonging to the genus Bacillus and excellent in the productivity of a protein or polypeptide.
SOLUTION: This variant bacteria belonging to the genus Bacillus is provided with that any of ≥1 genes selected from Bacillus subtilis ribosome protein genes rpmB, rpmF and rpmJ, and ribosome protein genes corresponding to these genes are deleted or inactivated, and the recombinant bacteria belonging to the genus Bacillus is provided by introducing a gene encoding the objective protein or polypeptide into the variant bacteria belonging to the genus Bacillus, as capable of expressing the same.
Outline of related art and contending technology (In Japanese)



微生物による有用物質の工業的生産は、アルコール飲料や味噌、醤油等の食品類をはじめとし、アミノ酸、有機酸、核酸関連物質、抗生物質、糖質、脂質、タンパク質等、その種類は多岐に渡っており、またその用途についても食品、医薬品、洗浄剤、化粧品等の日用品、或いは各種化成品原料に至るまで幅広い分野に広がっている。





こうした微生物による有用物質の工業生産においては、その生産性の向上が重要な課題の一つであり、その手法として、突然変異等の遺伝学的手法による生産菌の育種が行われてきた。特に最近では、微生物遺伝学、バイオテクノロジーの発展により、遺伝子組換え技術等を用いたより効率的な生産菌の育種が行われるようになっている。





リボソームは、あらゆる生物の細胞内に存在する構造であり、mRNAの遺伝情報を読み取ってタンパク質へと変換するプロセスである翻訳が行われる機構である。リボソームは大小2つのサブユニットからなり、各サブユニットはリボソームタンパク質とリボソームRNA(rRNA)の複合体である。例えば枯草菌の場合、リボソームは他の細菌と同様に50S及び30Sサブユニットからなり(非特許文献1)、リボソーム全体としては57種類のリボソームタンパク質と3種類のrRNAから構成されている。リボソーム中で、rRNAは密に折り畳まれてコアを形成し、翻訳プロセスにおけるペプチド結合形成の触媒作用に中心的な役割を果たしている。一方、リボソームタンパク質は通常リボソーム表面に存在してrRNAの隙間を埋めており、主にRNAコアの安定化に貢献している。リボソームの細胞における重要性からみて、ほとんどのリボソームタンパク質遺伝子は必須遺伝子と考えられている(非特許文献2)。

Field of industrial application (In Japanese)



本発明は、新規な変異バチルス属細菌、及び当該変異バチルス属細菌を用いたタンパク質又はポリペプチドの製造に関する。

Scope of claims (In Japanese)
【請求項1】
 
枯草菌リボソームタンパク質遺伝子rpmB、rpmF及びrpmJならびにそれらの遺伝子と90%以上の塩基配列同一性を有し、50Sリボソームタンパク質をコードするバチルス属細菌遺伝子から選択される遺伝子のいずれか1以上が欠失又は不活性化されており、且つ目的タンパク質又はポリペプチドをコードする遺伝子が発現可能に導入されており、
該目的タンパク質又はポリペプチドをコードする遺伝子の上流に、転写開始制御領域、翻訳開始制御領域及び分泌シグナル領域からなる3領域が作動可能に結合されており、
該3領域が、配列番号1の塩基番号1~659で示される塩基配列からなるDNA断片、配列番号3の塩基番号1~696で示される塩基配列からなるDNA断片、又は該DNA断片のいずれかと90%以上の塩基配列同一性を有するDNA断片である、
組換えバチルス属細菌。

【請求項2】
 
前記目的タンパク質又はポリペプチドがセルラーゼである請求項1記載の組換えバチルス属細菌。

【請求項3】
 
組換え枯草菌株である請求項1又は2記載の組換えバチルス属細菌。

【請求項4】
 
請求項1~3のいずれか1項記載の組換えバチルス属細菌を用いるタンパク質又はポリペプチドの製造方法。
IPC(International Patent Classification)
F-term
State of application right Registered
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