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CELLULASE-MEASURING REAGENT, AND METHOD FOR MEASURING CELLULASE

Patent code P110002501
File No. FP200802
Posted date Apr 28, 2011
Application number P2008-261575
Publication number P2010-088349A
Patent number P5359169
Date of filing Oct 8, 2008
Date of publication of application Apr 22, 2010
Date of registration Sep 13, 2013
Inventor
  • (In Japanese)高貝慶隆
  • (In Japanese)小玉賢志
Applicant
  • (In Japanese)国立大学法人福島大学
Title CELLULASE-MEASURING REAGENT, AND METHOD FOR MEASURING CELLULASE
Abstract PROBLEM TO BE SOLVED: To provide a cellulase-measuring reagent capable of measuring the cellulase quickly in a high sensitivity, and a method for measuring the cellulase.
SOLUTION: This cellulase-measuring reagent includes a metal complex-bonding cellulose obtained by bonding the hydroxy group of constituting glucose of the cellulose with the metal complex through a reactive group. The method for measuring the cellulase includes hydrolyzing the glycoside bond of the cellulose by effecting the cellulase on the cellulase-measuring reagent and measuring the concentration of the cellulase based on the concentration of the metal in the metal complex immobilized to the produced hydrolysate.
Outline of related art and contending technology (In Japanese)


バイオエネルギー関連技術において、セルロースを糖化させるセルラーゼに大きな注目が集まっている。現在は、サトウキビ、トウモロコシ等を主原料とする糖分からエタノール・メタノールへと変換されているが、穀物などの食資源にエネルギー源を依存することは望ましい姿とは言えない。そこで、近年、食資源の代替として、植物、木材、綿、紙などの主成分であるセルロースを利用することが考えられているが、工業化に至っていない。この理由として、高性能なセルラーゼ(セルロースを分解する酵素)を生産する微生物の発見に至っていないことがある。更に、この理由として、セルラーゼ測定技術が乏しいことが挙げられる。



従来、セルラーゼの測定方法の1つとして、セルロースを染色した後にセルラーゼで加水分解し、溶出してきた染色物について、光度法で測定する方法(非特許文献1)、フローインジェクション分析法(FIA法)で測定する方法(非特許文献2)が知られている。



【非特許文献1】
M.Leisola他、Anal.Biochem.,70,592-599(1976)
【非特許文献2】
P.J.Worsfold他、J.Biotechnol.,14,81-87(1990)



ところで、セルラーゼを生産する微生物のスクリーニングにおいては、有能な微生物を見落とさないようにするための観点から、特に、高感度でセルラーゼを測定することが重要であるが、光度法やFIA法を利用した上記の従来法は、セルラーゼの測定感度の点で不十分である。また、上記の方法においては、分解物が一定の化学種でないことや溶出した色素がセルラーゼと再会合して吸収波長がシフトするという問題がある。

Field of industrial application (In Japanese)


本発明はセルラーゼ測定試薬およびセルラーゼの測定方法に関する。

Scope of claims (In Japanese)
【請求項1】
 
セルロースの構成グルコースの水酸基に反応基を介して金属錯体を結合した金属錯体結合型セルロースから成ることを特徴とするセルラーゼ測定試薬。

【請求項2】
 
金属錯体が金属フタロシアニンである請求項1に記載のセルラーゼ測定試薬。

【請求項3】
 
請求項1又は2に記載のセルラーゼ測定試薬にセルラーゼを作用させてセルロースのグリコシド結合を加水分解し、生成する加水分解物に固定された金属錯体中の金属の濃度に基づき、セルラーゼの濃度を測定することを特徴とするセルラーゼの測定方法。
IPC(International Patent Classification)
F-term
State of application right Registered
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