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METHOD FOR PRODUCING NEURAL STEM CELL, MOTONEURON AND GABA-OPERATING NEURON FROM EMBRYONIC STEM CELL meetings achieved

Patent code P110002853
File No. A192P01
Posted date Jun 8, 2011
Application number P2001-099074
Publication number P2002-291469A
Patent number P3660601
Date of filing Mar 30, 2001
Date of publication of application Oct 8, 2002
Date of registration Mar 25, 2005
Inventor
  • (In Japanese)岡野 栄之
  • (In Japanese)島崎 琢也
Applicant
  • (In Japanese)国立研究開発法人科学技術振興機構
Title METHOD FOR PRODUCING NEURAL STEM CELL, MOTONEURON AND GABA-OPERATING NEURON FROM EMBRYONIC STEM CELL meetings achieved
Abstract PROBLEM TO BE SOLVED: To provide a method for selectively producing neural stem cells from embryonic stem cells (ES cells) and further producing selectively and efficiently motoneuron and GABA(γ-aminobutyric acid)-operating neuron.
SOLUTION: This method for producing the motoneuron and GABA-operating neuron is characterized by culturing embryonic stem cells in the presence or absence of Noggin protein in a floated state to form the embryoid, culturing the embryoid in the presence of a fibroblast-proliferating factor and sonic hedgehog protein in a floated state to induce neural stem cells, and then differentiating the neural stem cells. Thereby, at least the motoneurons and GABA- operating neurons can systematically and efficiently be produced from the ES cells. If the neurons are selectively obtained, the neurons will be able to be applied to transplantation treatments for amyotrophic lateral sclerosis, Huntington's chorea, Alzheimer's disease, and the like.
Outline of related art and contending technology (In Japanese)


哺乳類の中枢神経系において神経幹細胞は個体の一生を通して存在し続け、多様なニューロンやグリアを生産することによって、中枢神経系の発生及び維持に寄与していると考えられている。最近、ヒトを含めた哺乳動物の脳より神経幹細胞を分離・培養する技術が開発され、様々な神経変性疾患や損傷に対する細胞移植治療への応用が期待されている。しかしながら、発生過程において、様々な内的及び外的因子による制御によって幹細胞から産生され分化する様々なタイプのニューロン、特に胚発生初期に特異的に産生される運動ニューロンなどを、in vitroで培養増幅させた神経幹細胞から生産する試みは確たる成果を上げていない。

Field of industrial application (In Japanese)


本発明は胚性幹細胞(ES細胞)から選択的に神経幹細胞、さらには選択的かつ効率的に運動ニューロン及びGABA作動性ニューロンを製造する方法に関する。

Scope of claims (In Japanese)
【請求項1】
 
胚性幹細胞を、培地中培養上清換算で1~50%(v/v)のノギン蛋白質の存在下で浮遊培養して胚様体を形成させ、これを分散後、培地中10~40ng/mLの繊維芽細胞増殖因子FGF-2及び培地中1~10nMのソニックヘッジホッグ蛋白質の存在下で浮遊培養してニューロスフェアを形成する神経幹細胞に誘導し、次いでこれを分化させることを特徴とする運動ニューロン及びGABA作動性ニューロンの製造法。

【請求項2】
 
胚様体の浮遊培養期間が7~9日間である請求項1記載の製造法。

【請求項3】
 
得られるニューロンが、ほとんど運動ニューロンとGABA作動性ニューロンである請求項1又は2記載の製造法。
IPC(International Patent Classification)
F-term
State of application right Registered
Reference ( R and D project ) CREST Development, Differentiation, and Regeneration in Biological Systems AREA
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