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COMPOSITION FOR DETECTING IN VIVO GENE EXPRESSION

Patent code P110005027
Posted date Aug 18, 2011
Application number P2004-007548
Publication number P2005-198545A
Patent number P4340735
Date of filing Jan 15, 2004
Date of publication of application Jul 28, 2005
Date of registration Jul 17, 2009
Inventor
  • (In Japanese)藤林 靖久
  • (In Japanese)古川 高子
  • (In Japanese)高松 真二
  • (In Japanese)森 哲也
Applicant
  • (In Japanese)国立大学法人福井大学
Title COMPOSITION FOR DETECTING IN VIVO GENE EXPRESSION
Abstract PROBLEM TO BE SOLVED: To provide a system for detecting in vivo gene expression as a method for determining life and death of a functional cell, an ES cell, etc., in cell transplantation treatment, expression monitoring of a treatment gene in gene therapy, etc., since recently cell transplantation treatment using an embryonic stem cell in reproduction treatment is being actualized and gene therapy seems to be established as one of selection of actual clinical treatment with finding of embryonic stem cell and tissue stem cell, establishment of its cultured cell strain and successive development of differentiation induction conditions to specific cells, however, in the present state of things, a technique for accurate grasp is not obtained except collection and investigation in many cases.
SOLUTION: Expression of in vivo gene is noninvasively detected by Mer protein containing a synthetic steroid derivative to selectively combine with Mer protein produced by expression of transformed cell having plasmid incorporated with a gene (Mer) encoding a variant estrogen receptor having no binding ability to natural estrogen as a reporter gene.
Outline of related art and contending technology (In Japanese)

近年、胚性幹細胞や組織幹細胞の発見とその培養細胞株の樹立、さらに特定細胞への分化誘導条件の相次ぐ開発に伴い、再生医療における胚性幹細胞を用いた細胞移植治療が現実のものとなりつつあり、遺伝子治療も実際の臨床治療の選択の一つとして確立されてきた。(非特許文献1、2および3)しかしながら、生体内へ移植した細胞の機能はもとより、その生死すら、多くの場合体外に取り出して調べる他に正確に把握する術を持たないのが現状である。そこで、細胞移植治療における機能性細胞もしくはES細胞等の生死判別や、遺伝子治療における治療遺伝子の発現モニタリングなどの方法として、インビボ遺伝子発現検出システムの開発が切望されていた。
【非特許文献1】
Stem cells and regenerative medicine Hum. Cell (2002), 15, 190-198.
【非特許文献2】
Monitoring of implanted stem cell migration in vivo: a highly resolved in vivo magnetic resonance imaging investigation of experimental stroke in rat. Proc. Natl. Acad. Sci. USA (2002), 99, 16267-16272.
【非特許文献3】
High-level sustained transgene expression in human embryonic stem cells using lentiviral vectors. Stem cells (2003), 21, 111-117.

Field of industrial application (In Japanese)

本発明は、L-アミノ酸変異等によりリガンド結合特異性が変化し、天然エストロゲンとの結合能を失った変異型エストロゲン・レセプター遺伝子をコードする遺伝子(Mer)をレポーター遺伝子として組み込んだプラスミドを含む形質転換細胞が発現して産生するMer蛋白と選択的に結合する合成ステロイド誘導体をMer蛋白の非侵襲的生体内レセプター遺伝子発現検出プローブとして利用することに関する。

Scope of claims (In Japanese)
【請求項1】
 
天然エストロゲンとの結合能を有せず、マウス・エストロゲン・レセプターの525番目のGlyがArgへ1アミノ酸変異した変異型エストロゲン・レセプターをコードする遺伝子(Mer)をレポーター遺伝子として組み込んだプラスミドを有する形質転換細胞が発現して産生するMer蛋白と選択的に結合する合成ステロイド誘導体を含んでなる非侵襲的生体内遺伝子発現検出用組成物。

【請求項2】
 
レポーター遺伝子を組み込んだプラスミドを有する細胞がMer蛋白を常時発現する胚性幹細胞である請求項1記載の生体内遺伝子発現検出用組成物。

【請求項3】
 
レポーター遺伝子を組み込んだプラスミドを有する細胞がMer蛋白をミフェプリストンにより発現する胚性幹細胞である請求項1記載の生体内遺伝子発現検出用組成物。
IPC(International Patent Classification)
F-term
State of application right Registered
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