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METHOD AND KIT FOR DETECTING OR QUANTITATIVELY DETERMINING TARGET SUBSTANCE IN SPECIMEN

Patent code P130008528
File No. S2012-0939-N0
Posted date Feb 7, 2013
Application number P2012-161928
Publication number P2014-021016A
Patent number P6083849
Date of filing Jul 20, 2012
Date of publication of application Feb 3, 2014
Date of registration Feb 3, 2017
Inventor
  • (In Japanese)朴 龍洙
  • (In Japanese)董 金華
  • (In Japanese)李 在範
  • (In Japanese)周 宏建
Applicant
  • (In Japanese)国立大学法人静岡大学
Title METHOD AND KIT FOR DETECTING OR QUANTITATIVELY DETERMINING TARGET SUBSTANCE IN SPECIMEN
Abstract PROBLEM TO BE SOLVED: To provide a new method and a kit for detecting or quantitatively determining a target substance in a specimen.
SOLUTION: The method for detecting a target substance in a specimen includes: an incubation step for adding a metal nanoparticle by which a first probe is stabilized and a quantum dot by which a second probe is stabilized to each of negative contrasts not containing the specimen or the target substance and incubating the contrasts; a fluorescence measurement step for measuring the fluorescence intensity of the quantum dot in the specimen and the negative contrasts after the incubation step; and a determination step for determining existence of the target substance in the specimen if the fluorescence intensity of the quantum dot in the specimen is stronger than in the negative contrasts; the first probe and the second probe being connected to the target substance but not connected to each other, and the fluorescence intensity of the quantum dot being intensified by the proximity of the metal nanoparticle to the quantum dot brought about by connection of the first probe and the second probe with the target substance.
Outline of related art and contending technology (In Japanese)

従来、試料中の標的物質を検出又は定量する方法として、抗原と抗体の反応を利用した酵素結合免疫吸着法(ELISA)が知られている。

一方、例えば非特許文献1には、金ナノ粒子により、量子ドットのフォトルミネッセンスの強度が増強することが記載されている。

Field of industrial application (In Japanese)

本発明は、試料中の標的物質を検出又は定量する方法及びキットに関する。

Scope of claims (In Japanese)
【請求項1】
 
試料中の標的物質を検出する方法であって、
試料及び標的物質を含まない陰性対照のそれぞれに、第1のプローブを固定化した金属ナノ粒子及び第2のプローブを固定化した量子ドットを添加してインキュベーションするインキュベーション工程と、
インキュベーション工程後の試料及び陰性対照中の量子ドットの蛍光強度を測定する蛍光測定工程と、
試料中の量子ドットの蛍光強度が、陰性対照中の量子ドットの蛍光強度と比較して強い場合に、試料中に標的物質が存在すると判定する判定工程と、
を含み、
第1のプローブ及び第2のプローブは、標的物質と結合するが互いに結合せず、第1のプローブ及び第2のプローブが標的物質と結合することにより、金属ナノ粒子及び量子ドットが近接し、それにより量子ドットの蛍光強度が増強する、方法。

【請求項2】
 
試料中の標的物質を定量する方法であって、
試料及び既知濃度の標的物質を含む複数の標準試料のそれぞれに、第1のプローブを固定化した金属ナノ粒子及び第2のプローブを固定化した量子ドットを添加してインキュベーションするインキュベーション工程と、
インキュベーション工程後の試料及び複数の標準試料中の量子ドットの蛍光強度を測定する蛍光測定工程と、
試料中の量子ドットの蛍光強度を、複数の標準試料中の量子ドットの蛍光強度と比較して、試料中の標的物質を定量する定量工程と、
を含み、
第1のプローブ及び第2のプローブは、標的物質と結合するが互いに結合せず、第1のプローブ及び第2のプローブが標的物質と結合することにより、金属ナノ粒子及び量子ドットが近接し、それにより量子ドットの蛍光強度が増強する、方法。

【請求項3】
 
金属ナノ粒子は、金平糖状金属ナノ粒子である、請求項1又は2に記載の方法。

【請求項4】
 
金属ナノ粒子は、金ナノ粒子である、請求項1~3のいずれか一項に記載の方法。

【請求項5】
 
量子ドットは、可視光領域の蛍光を発するものである、請求項1~4のいずれか一項に記載の方法。

【請求項6】
 
第1のプローブ及び第2のプローブは、抗原、抗体、レクチン、糖、レセプター、リガンド、アプタマー又は核酸である、請求項1~5のいずれか一項に記載の方法。

【請求項7】
 
試料中の標的物質の検出又は定量用キットであって、
第1のプローブを固定化した金属ナノ粒子及び第2のプローブを固定化した量子ドットを含み、
第1のプローブ及び第2のプローブは、標的物質と結合するが互いに結合せず、第1のプローブ及び第2のプローブが標的物質と結合することにより、金属ナノ粒子及び量子ドットが近接し、それにより量子ドットの蛍光強度が増強する、キット。

【請求項8】
 
金属ナノ粒子は、金平糖状金属ナノ粒子である、請求項7に記載のキット。

【請求項9】
 
金属ナノ粒子は、金ナノ粒子である、請求項7又は8に記載のキット。

【請求項10】
 
量子ドットは、可視光領域の蛍光を発するものである、請求項7~9のいずれか一項に記載のキット。

【請求項11】
 
第1のプローブ及び第2のプローブは、抗原、抗体、レクチン、糖、レセプター、リガンド、アプタマー又は核酸である、請求項7~10のいずれか一項に記載のキット。
IPC(International Patent Classification)
F-term
Drawing

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JP2012161928thum.jpg
State of application right Registered
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