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(In Japanese)セラミド誘導体およびこれを用いたゴルジ体標識化蛍光プローブ

Patent code P150011967
Posted date May 7, 2015
Application number P2013-529018
Patent number P6120222
Date of filing Aug 13, 2012
Date of registration Apr 7, 2017
International application number JP2012070631
International publication number WO2013024843
Date of international filing Aug 13, 2012
Date of international publication Feb 21, 2013
Priority data
  • P2011-177720 (Aug 15, 2011) JP
Inventor
  • (In Japanese)西田 篤司
  • (In Japanese)中村 浩之
  • (In Japanese)牧山 智彦
  • (In Japanese)村山 俊彦
Applicant
  • (In Japanese)国立大学法人千葉大学
Title (In Japanese)セラミド誘導体およびこれを用いたゴルジ体標識化蛍光プローブ
Abstract (In Japanese)
【課題】
 ゴルジ体を選択的に蛍光標識するための、細胞障害性が低く細胞内安定性に優れた手段を提供する。
【解決手段】
 本発明によれば、下記化学式1:
(式省略)
式中、R1は、炭素原子数1~12のアルキル基であり、R2は、炭素原子数1~20のアルキル基であり、nは、1~20の整数である、
で表されるセラミド誘導体、およびこれを用いたゴルジ体標識化蛍光プローブが提供される。
【選択図】
 図4
Outline of related art and contending technology (In Japanese)

ゴルジ体は小胞輸送経路の中心に位置する細胞内小器官で、ほとんどの真核生物の細胞に存在する。ゴルジ体の主な機能は、タンパク質の修飾と選別輸送であるが、一部の脂質や糖脂質の合成をも行う重要な細胞内小器官である。タンパク質が正常に機能するためにはゴルジ体の働きが非常に重要であり、また生体内の重要な脂質であるスフィンゴ脂質はその9割以上がゴルジ体で合成される。このように、ゴルジ体の機能およびゴルジ体で機能するタンパク質を研究することは生命現象を理解する上で非常に重要である。

ところで、タンパク質や脂質の細胞内輸送や、ゴルジ体で機能するタンパク質を解析する研究では、しばしばその細胞内局在を蛍光顕微鏡にて観察することが行われる。この際、ゴルジマーカー(ゴルジ体標識化プローブ)と目的タンパク質とを共染色することで、目的タンパク質がゴルジ体に局在していることを証明することもよく行われる。したがって、ゴルジ体を選択的に染色しうるゴルジ体標識化プローブを開発することは、これらの研究の発展にとって非常に有用である。

ここで、例えば非特許文献1には、従来のゴルジ体標識化蛍光プローブとして、NBD-C6-セラミドと称されるセラミド誘導体が記載されている。このNBD-C6-セラミドは、内在性セラミド(N-アシルスフィンゴシン)が蛍光標識されてなるものであり、下記の化学構造で示されるように、セラミドのN-アシル部位に蛍光発色団が導入されている。NBD-C6-セラミドは、かような化学構造に起因して、細胞に添加されると細胞内に取り込まれ、ゴルジ体を選択的に染色することができる。

【化1】
(省略)

Field of industrial application (In Japanese)

本発明は、セラミド誘導体およびこれを用いたゴルジ体標識化蛍光プローブに関する。

Scope of claims (In Japanese)
【請求項1】
 
下記化学式3:
【化1】
 
(省略)
で表される、セラミド誘導体。

【請求項2】
 
請求項1に記載のセラミド誘導体を含む、ゴルジ体標識化蛍光プローブ。

【請求項3】
 
請求項2に記載のゴルジ体標識化蛍光プローブを、被検細胞に接触させる工程と、
前記蛍光プローブの発する蛍光信号を測定する工程と、
を含む、被検細胞におけるゴルジ体の存在部位を特定する方法。

【請求項4】
 
請求項2に記載のゴルジ体標識化蛍光プローブを、被検細胞に接触させる工程と、
前記蛍光プローブの発する蛍光信号を測定する工程と、
蛍光標識された被検化合物を、前記被検細胞に接触させる工程と、
前記被検化合物の発する蛍光信号を測定する工程と、
を含む、被検細胞における被検化合物のゴルジ体への局在化の有無またはその程度を測定する方法。
IPC(International Patent Classification)
F-term
Drawing

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JP2013529018thum.jpg
State of application right Registered
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