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SEX DETERMINATION METHOD FOR GERM CELL OF FISH, SEX DISCRIMINATION METHOD, EVALUATION METHOD FOR DISTURBANCE ACTION OF SEX DIFFERENTIATION OF TEST SUBSTANCE, HERMAPHRODITE MAKING METHOD, EARLY MATURE INDIVIDUAL MAKING METHOD, GERM CELL, FISH INDIVIDUAL, GAMETE, AND CULTURED CELL

Patent code P150012495
Posted date Oct 28, 2015
Application number P2014-241331
Publication number P2015-126729A
Patent number P6512542
Date of filing Nov 28, 2014
Date of publication of application Jul 9, 2015
Date of registration Apr 19, 2019
Priority data
  • P2013-248269 (Nov 29, 2013) JP
Inventor
  • (In Japanese)田中 実
  • (In Japanese)西村 俊哉
Applicant
  • (In Japanese)大学共同利用機関法人自然科学研究機構
Title SEX DETERMINATION METHOD FOR GERM CELL OF FISH, SEX DISCRIMINATION METHOD, EVALUATION METHOD FOR DISTURBANCE ACTION OF SEX DIFFERENTIATION OF TEST SUBSTANCE, HERMAPHRODITE MAKING METHOD, EARLY MATURE INDIVIDUAL MAKING METHOD, GERM CELL, FISH INDIVIDUAL, GAMETE, AND CULTURED CELL
Abstract PROBLEM TO BE SOLVED: To provide a sex determination method for a germ cell, which can control the sex of a germ cell of fish, and a germ cell, a fish individual, a gamete and a cultured cell of which sex is determined by the sex determination method.
SOLUTION: The expression of foxl2b gene in a germ cell of fish is inhibited to control the sex of the germ cell.
Outline of related art and contending technology (In Japanese)

生殖細胞は、将来の卵や精子になる生殖において重要な細胞である。生殖細胞は、発生初期に体内を移動し、生殖腺が形成されるタイミングで生殖腺へと入り込む。その後、卵になるか精子になるかの決定や配偶子形成は、生殖腺を構成する体細胞に依存している。すなわち、生殖過程の制御は、生殖細胞非自律的に制御され、体細胞や内分泌環境に依存していると考えられてきた。そして、この制御の主要な部分は、哺乳類から魚類までのすべての脊椎動物で保存されていると予想されている。

哺乳類の場合には、体細胞側で決まる性によって生殖細胞の運命も異なることが明らかにされている。すなわち、哺乳類では発生初期の生殖腺原基に雌雄の違いはなく、精巣にも卵巣にも分化することが可能である。ところが、Y染色体を持つ通常の雄ではやがてY染色体上のSRY遺伝子が体細胞で発現し、このSRY遺伝子によって生殖腺原基から精巣への分化が誘導されることが分かってきている(非特許文献1参照)。また、メダカでもY染色体上のDmy遺伝子が生殖腺の体細胞で発現することで雄になることが明らかにされている(非特許文献2参照)。

Field of industrial application (In Japanese)

本発明は、魚類の生殖細胞の性決定方法、性判別方法、被検物質の性分化の攪乱作用の評価方法、雌雄同体の作製方法、早期成熟個体の作製方法、生殖細胞、魚類個体、配偶子、及び培養細胞に関する。詳しくは、foxl2b遺伝子を用いた性決定方法、性判別方法、被検物質の性分化の攪乱作用の評価方法、雌雄同体の作製方法、及び早期成熟個体の作製方法、並びにfoxl2b遺伝子を操作して得られる生殖細胞、魚類個体、配偶子、及び培養細胞に関する。

Scope of claims (In Japanese)
【請求項1】
 
魚類個体の生殖細胞の性を決定する方法であって、
遺伝子型が雌の前記魚類個体のfoxl2b遺伝子の発現を抑制することにより、前記生殖細胞を精子に分化させることを特徴とする性決定方法。

【請求項2】
 
性的未分化の生殖細胞又は性的可塑性を保っている生殖細胞を有する前記魚類個体のfoxl2b遺伝子の発現を抑制する、請求項1に記載の性決定方法。

【請求項3】
 
生殖細胞でfoxl2b遺伝子が発現する時期にその発現を抑制することにより前記生殖細胞を精子に分化させる、請求項2に記載の性決定方法。

【請求項4】
 
前記生殖細胞を遺伝子型とは異なる性に分化させる、請求項1~3のいずれか一項に記載の性決定方法。

【請求項5】
 
foxl2b遺伝子の発現が抑制された、遺伝子型が雌の魚類個体の生殖細胞。

【請求項6】
 
請求項5に記載の生殖細胞を有する魚類個体。

【請求項7】
 
foxl2b遺伝子のホモ接合変異を持つ、foxl2b遺伝子の発現が抑制された生殖細胞を有する魚類個体。

【請求項8】
 
雌雄同体である、請求項6又は7に記載の魚類個体。

【請求項9】
 
早期成熟個体である、請求項6~8のいずれか一項に記載の魚類個体。

【請求項10】
 
請求項5に記載の生殖細胞に由来する配偶子。

【請求項11】
 
請求項10に記載の配偶子を用いて受精を行い、その受精卵を孵化させて得られる魚類個体。

【請求項12】
 
請求項5に記載の生殖細胞を培養して得られる培養細胞。

【請求項13】
 
遺伝子型が雌の魚類個体のfoxl2b遺伝子の発現を抑制することにより雌雄同体の魚類個体を作製する、雌雄同体の作製方法。

【請求項14】
 
遺伝子型が雌の魚類個体のfoxl2b遺伝子の発現を抑制することにより、早期成熟個体である魚類個体を作製する、早期成熟個体の作製方法。

【請求項15】
 
魚類個体の生殖細胞の雌雄を判別する方法であって、
前記魚類個体のfoxl2b遺伝子の発現を検出する検出工程と、
前記検出工程による検出結果に基づいて前記生殖細胞の雌雄を判別する工程と、を含む性判別方法。

【請求項16】
 
前記検出工程は、幹細胞型生殖細胞又はシスト型生殖細胞を有する前記魚類個体のfoxl2b遺伝子の発現を検出する工程である、請求項15に記載の性判別方法。

【請求項17】
 
被験物質の性分化の攪乱作用を評価する方法であって、
前記被験物質を、遺伝子型が雌の魚類個体に投与する工程と、
前記魚類個体のfoxl2b遺伝子の発現を検出する工程と、
該検出結果と前記魚類個体の遺伝子型の性とに基づいて、前記被験物質によって性分化が攪乱作用を受けたか否かを判定する工程と、を含む評価方法。
IPC(International Patent Classification)
F-term
Drawing

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JP2014241331thum.jpg
State of application right Registered


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