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SCAFFOLDING MEMBER FOR LIQUID MEDIUM meetings

Patent code P160013053
File No. 10-084
Posted date Jun 15, 2016
Application number P2011-064374
Publication number P2012-200152A
Patent number P5868601
Date of filing Mar 23, 2011
Date of publication of application Oct 22, 2012
Date of registration Jan 15, 2016
Inventor
  • (In Japanese)村山 晃一
  • (In Japanese)今泉 卓三
  • (In Japanese)後藤 直美
  • (In Japanese)青柳 秀紀
Applicant
  • (In Japanese)フタムラ化学株式会社
  • (In Japanese)国立大学法人筑波大学
Title SCAFFOLDING MEMBER FOR LIQUID MEDIUM meetings
Abstract PROBLEM TO BE SOLVED: To provide a scaffolding member for liquid mediums that allows the use of a liquid medium not containing agar so as to make it possible to avoid the influence of growth inhibition by agar, while also eliminating handling complication in liquid mediums, and making it possible to easily culture desired species.
SOLUTION: The scaffolding member 10A for liquid mediums includes an infiltration base part 11 of a nonwoven fabric made from regenerated cellulose fibers that absorbs and retains a liquid medium 3 on contact with the liquid medium 3, and a permeable film part 15 which is a semi-permeable film of a regenerated cellulose film to be placed on the infiltration base part 11. A desired species is injected onto the permeable film part 15 and cultured.
Outline of related art and contending technology (In Japanese)

自然界に生育する微生物を単離する場合、土壌等の環境試料を採取し適度に希釈後、栄養分を溶解した平板状の寒天培地に塗布もしくはあるいはスラント状の寒天培地に接種し、コロニーの生成により微生物の生育を確認していた。そして、微生物のコロニーを分取しさらに別の寒天培地上に塗布、接種を繰り返すことにより、純度が高まり均一の微生物を単離することができる。

一般的な寒天培地の場合、培地中に約1.5%の寒天が含まれる。寒天培地は安価かつ簡便に作成できる。また、寒天の主成分であるアガロースは微生物の栄養となりにくいため、培地中に含有される栄養分の調節が容易であり、培地を通じて微生物を選択することもできる。このため、寒天培地は微生物の単離、培養等において広汎に利用されている。

これまでの知見によると、たいていの微生物は前述の寒天培地により培養できると考えられていた。ところが、寒天培地の改良を進めるに際し、自然界に生育する微生物において、寒天培地により単離し、培養することができる微生物は極めて少ないと考えられるようになってきた。近年のDNA分析の発達により各種微生物をあらためて調査したところ、寒天培地により単離し、培養することができる微生物は、一説によると全種の1%程度に過ぎないともいわれている。現状、寒天に含まれるアガロース等の成分がどのように微生物の生育に影響を及ぼすのかは未だ明らかにされていない。

このように、寒天培地による単離、培養が困難な微生物は「難培養性微生物」と称されることがある。前記の難培養性微生物においても、汚染物質の分解等の環境改善作用、新規抗生剤等の薬理作用、その他の有用作用が期待され、未利用資源として注目を集めている。難培養性微生物は現実に存在しているにもかかわらず、寒天培地により単離できないことから有効に活用されていない。

そこで、寒天培地に依存しない器具、方法が提案されている(特許文献1参照)。特許文献1では次のとおり開示される。微多孔膜の表面に微生物を捕集した後、捕集した面を下向きにする。押さえリングとベースからなる微多孔膜支持体に微多孔膜を固定する。捕集面の反対側の面に液体培地を接触させる。液体培地は微多孔膜を浸透することにより、微生物に到達できる。培地養分を得た微生物は、微多孔膜の下側面にコロニーを形成することになる。

しかしながら、特許文献1に開示の器具等の場合、培養時に微生物を接種した微多孔膜の面を下側にひっくり返す必要がある。また、微多孔膜の上側に液体培地が滴下されるため、継代時の取り扱いが不便である。特に新規有用微生物のスクリーニングを行う際、一般的に多検体を取り扱う必要がある。しかし、特許文献1に開示の器具により多検体を取り扱うことは煩雑であり困難である。このため、特許文献1は寒天培地以外の培地への適用例としては注目に値するものの、培養等の取り扱いやすさにおいて改善が望まれる構成である。

次に、液体培地における微生物培養に特化した培養装置も提案されている(特許文献2参照)。特許文献2の装置は液体培地の培養槽中にポリフッ化ビニリデン等からなる多孔性中空糸膜を垂らし、この中空糸膜内に微生物を注入して培養する形態である。当該培養装置の使用により、微生物の単離培養の効率化が可能となった。

特許文献2の装置を用いて対象となる微生物を培養する場合、多孔性中空糸膜内に注入するときの微生物の濃度を正確に管理する必要がある。また、装置を構成する部品数も多く複雑である。このことから、操作が煩雑であり装置の導入に要する経費負担が増す。従って、安価に仕上げて多数の試料を取り扱うことを想定すると不向きである。

その後、発明者らは、培養対象となる微生物と寒天培地との直接接触を避ける構造について鋭意検討を重ねた。そして、寒天を使用しない液体培地においても簡便に生育可能な器材を完成させるに至った。

Field of industrial application (In Japanese)

本発明は、液体培地用足場部材に関し、特に寒天による生育阻害の影響を受けやすい生物種の培養に好適な液体培地用足場部材に関する。

Scope of claims (In Japanese)
【請求項1】
 
液体培地と接触し該液体培地を吸液して保持する浸透台部と、前記浸透台部に載置され前記浸透台部に吸液された前記液体培地を透過させる再生セルロースフィルムの半透膜である透過性膜部とを備えることを特徴とする液体培地用足場部材。

【請求項2】
 
前記浸透台部が、不織布である請求項1に記載の液体培地用足場部材。

【請求項3】
 
前記浸透台部が、再生セルロース繊維からなる不織布である請求項1に記載の液体培地用足場部材。

【請求項4】
 
前記浸透台部と密着しない側の前記透過性膜部において、当該透過性膜部の表面を区画する区画部が設けられる請求項1ないし3のいずれか1項に記載の液体培地用足場部材。

【請求項5】
 
前記区画部が、耐水性樹脂を前記透過性膜部の表面に塗工して得た格子状突部である請求項4に記載の液体培地用足場部材。
IPC(International Patent Classification)
F-term
Drawing

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JP2011064374thum.jpg
State of application right Registered
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