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CONSTITUTIVE EXPRESSION VECTOR FOR RHODOCOCCUS MICROORGANISMS

Patent code P160013173
File No. S2014-1485-N0
Posted date Aug 4, 2016
Application number P2014-180853
Publication number P2016-054652A
Patent number P6508761
Date of filing Sep 5, 2014
Date of publication of application Apr 21, 2016
Date of registration Apr 12, 2019
Inventor
  • (In Japanese)小林 達彦
  • (In Japanese)橋本 義輝
Applicant
  • (In Japanese)国立大学法人筑波大学
Title CONSTITUTIVE EXPRESSION VECTOR FOR RHODOCOCCUS MICROORGANISMS
Abstract PROBLEM TO BE SOLVED: To provide a vector which enables even Rhodococcus microorganisms having no H-NHase metabolism ability to express a desired protein under conditions without adding an inducer.
SOLUTION: The invention provides a vector containing any DNA of the following (a)-(c): (a) DNA consisting of a specific base sequence; (b) DNA which consists of a base sequence in which one or some bases are deleted, substituted, or added, and the DNA enables a Rhodococcus microorganism as a host to express a desired protein without addition of an inducer at the time of culture, in a specific base sequence; and (c) DNA which consists of a base sequence having 90% or more identity with a specific base sequence, and enables a Rhodococcus microorganism as a host to express a desired protein without addition of an inducer at the time of culture.
Outline of related art and contending technology (In Japanese)

従来より、ニトリル代謝酵素遺伝子プロモーターを用いた、ロドコッカス属微生物用誘導型発現ベクターが構築されている。このベクターは、ロドコッカス属微生物を宿主とし、培養時にイソバレロニトリルやε-カプロラクタム等の誘導剤を添加してタンパク質を異種発現させることができるものである(特許文献1)。

しかし、ニトリル代謝酵素遺伝子プロモーターを用いて、ロドコッカス属微生物を宿主とし、培養時に誘導剤を添加せずタンパク質を発現させるベクターの報告例は未だ無い。

Field of industrial application (In Japanese)

本発明は、ロドコッカス属微生物用構成型発現ベクターに関する。

Scope of claims (In Japanese)
【請求項1】
 
以下の(a)~(c)のいずれかのDNA。
(a)配列番号1に示される塩基配列からなるDNA
(b)配列番号1に示される塩基配列において、1~2個の塩基が欠失、置換もしくは付加された塩基配列からなり、かつロドコッカス属微生物を宿主として培養時に誘導剤を添加せずに目的タンパク質を発現させ得るDNA
(c)配列番号1に示される塩基配列に対して、99%以上の同一性を有する塩基配列からなり、かつロドコッカス属微生物を宿主として培養時に誘導剤を添加せずに目的タンパク質を発現させ得るDNA。

【請求項2】
 
請求項1記載のDNAを含むベクター。

【請求項3】
 
受託番号がNITE P-01928であるベクター。

【請求項4】
 
請求項2又は3に記載のベクターによりロドコッカス属微生物を形質転換した形質転換体。

【請求項5】
 
請求項2又は3に記載のベクターに目的タンパク質をコードするDNAを挿入した組換えベクターによりロドコッカス属微生物を形質転換した形質転換体を、誘導剤を含まない培地で培養し、得られる培養物から目的タンパク質を採取することを含む、目的タンパク質の製造方法。
IPC(International Patent Classification)
F-term
Drawing

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JP2014180853thum.jpg
State of application right Registered
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