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(In Japanese)DNAの検出方法

Patent code P170013976
File No. (S2014-0097-N0)
Posted date Apr 7, 2017
Application number P2015-543920
Patent number P6385356
Date of filing Oct 24, 2014
Date of registration Aug 17, 2018
International application number JP2014078298
International publication number WO2015060417
Date of international filing Oct 24, 2014
Date of international publication Apr 30, 2015
Priority data
  • P2013-221803 (Oct 25, 2013) JP
Inventor
  • (In Japanese)藤田 博之
  • (In Japanese)カルステン スタニスラフ エル
  • (In Japanese)コラール ドミニク
  • (In Japanese)久米村 百子
Applicant
  • (In Japanese)一般財団法人生産技術研究奨励会
  • (In Japanese)ニューロインディクス インク
  • (In Japanese)サントル ナショナル ドゥラ ルシェルシュ シヤンティフィック
Title (In Japanese)DNAの検出方法
Abstract (In Japanese)検出装置の一対の電極間を伸張させたDNAによって橋渡しさせ、突起の電極間を橋渡しするDNAの性質決定を行うことによって、DNAを、蛍光体等の標識物質を使用することなく、容易に、かつ、確実に検出することができるようにする。そのため、少なくとも一対の電極を備える検出装置を使用するDNAの検出方法であって、前記電極にプライマーを固定し、単鎖DNAの環状テンプレートを含有する溶液内に前記電極を浸し、前記環状テンプレートをアニールし、RCA(Rolling Circle Amplification)法によって単鎖DNA生成物を生成することにより、所定の電圧を印加した前記電極間を伸張したDNAによって橋渡しさせ、複数の単鎖DNA分子を含む前記電極間を橋渡しするDNAの性質決定を行うこと、を含む。
Outline of related art and contending technology (In Japanese)

従来、生物テロ防御、医療診断、食品安全性、環境モニタリング等の観点から、安価でロバストなDNAの検出方法が強く求められている。そこで、MEMS(Micro-Electro-Mechanical System)技術によって製作された微小鉗(かん)子を使用してDNAの検出を行う検出方法が提案されている(例えば、非特許文献1及び2参照。)。

Field of industrial application (In Japanese)

本発明は、DNAの検出方法に関するものである。

Scope of claims (In Japanese)
【請求項1】
 
少なくとも一対の電極を備える検出装置を使用するDNAの検出方法であって、
(a)前記電極にプライマーを固定し、
(b)単鎖DNAの環状テンプレートを含有する溶液内に前記電極を浸し、前記環状テンプレートをアニールし、RCA法によって単鎖DNA生成物を生成することにより、所定の電圧を印加した前記電極間を伸張したDNAによって橋渡しさせ、
(c)複数の単鎖DNA分子を含む前記電極間を橋渡しするDNAの性質決定を行うこと、
を含むことを特徴とするDNAの検出方法。

【請求項2】
 
前記電極の少なくとも一部は金で被覆されている請求項1に記載のDNAの検出方法。

【請求項3】
 
前記伸張したDNAによる前記電極間の橋渡しは、定温で行われる請求項1又は2に記載のDNAの検出方法。

【請求項4】
 
前記電極間を橋渡しするDNAの性質決定は、前記電極間を橋渡しするDNAの共振周波数に基づいて行われる請求項1~3のいずれか1項に記載のDNAの検出方法。

【請求項5】
 
前記電極間の間隔を所定の周波数で変化させる請求項4に記載のDNAの検出方法。

【請求項6】
 
前記電極間を橋渡しするDNAは束になっている請求項1~5のいずれか1項に記載のDNAの検出方法。

【請求項7】
 
前記電極間を橋渡しするDNAは、二本鎖DNA分子を含む束になっている請求項6に記載のDNAの検出方法。

【請求項8】
 
前記電極間を橋渡しするDNAの性質決定は、前記電極間を橋渡しするDNAの導電性に基づいて行われる請求項1~7のいずれか1項に記載のDNAの検出方法。

【請求項9】
 
前記電極間を橋渡しするDNAの性質決定は、前記電極間を橋渡しするDNAのリアルタイム計測によって行われる請求項1~8のいずれか1項に記載のDNAの検出方法。

【請求項10】
 
単鎖の相補的DNAが生成されるように、対向する電極には異なるプライマーを固定する請求項1~9のいずれか1項に記載のDNAの検出方法。

【請求項11】
 
複数の電極対に複数のプライマーを固定することによって、複数のDNAの性質決定を行う請求項1~10のいずれか1項に記載のDNAの検出方法。

【請求項12】
 
少なくとも一対の電極を備える検出装置を使用するDNAの検出方法であって、
(a)前記電極にプライマーを固定し、
(b)単鎖DNAの環状テンプレートを含有する溶液内に前記電極を浸し、前記環状テンプレートをアニールし、RCA法によって単鎖DNA生成物を生成することにより、所定の電圧を印加した前記電極間を伸張したDNAによって橋渡しさせ、
(c)前記電極間を橋渡しするDNAに導電性の微粒子を被覆し、
(d)前記電極間を橋渡しするDNAの存在を確認すること、
を含むことを特徴とするDNAの検出方法。

【請求項13】
 
複数の電極対に複数のプライマーを固定することによって、複数のDNAの存在を確認する請求項12に記載のDNAの検出方法。
IPC(International Patent Classification)
F-term
Drawing

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JP2015543920thum.jpg
State of application right Registered


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