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(In Japanese)トリアシルグリセロール高生産性藻類の作製法

Patent code P170014118
File No. (S2014-0535-N0)
Posted date May 10, 2017
Application number P2016-507824
Patent number P6537146
Date of filing Mar 12, 2015
Date of registration Jun 14, 2019
International application number JP2015057302
International publication number WO2015137449
Date of international filing Mar 12, 2015
Date of international publication Sep 17, 2015
Priority data
  • P2014-049651 (Mar 13, 2014) JP
Inventor
  • (In Japanese)岩井 雅子
  • (In Japanese)太田 啓之
  • (In Japanese)下嶋 美恵
Applicant
  • (In Japanese)国立大学法人東京工業大学
Title (In Japanese)トリアシルグリセロール高生産性藻類の作製法
Abstract (In Japanese)藻類の細胞中にトリアシルグリセロールを効率的に蓄積させることを目的として、トリアシルグリセロール合成酵素遺伝子とリン欠乏応答プロモーターと3'非翻訳領域を藻類に導入する方法を提供する。
Outline of related art and contending technology (In Japanese)

クラミドモナス・レインハーディ(Chlamydomonas reinhardtii、以下「C. reinhardtii」という場合がある。)などの藻類にTAG合成酵素遺伝子を導入し、それにより細胞中にTAG蓄積させることは従来行われてきた(特許文献1、非特許文献1)。

例えば、非特許文献1には、C. reinhardtiiに、強発現プロモーターであるpsaDを付加したDGAT2遺伝子を導入し、これを窒素又は硫黄欠乏条件下で培養し、TAGを細胞中に蓄積させる方法が記載されている。特許文献1にも、非特許文献1と同様に、psaDを付加したDGAT2遺伝子を導入したC. reinhardtiiが記載されている。

TAGの生産に関しては、C. reinhardtii以外にも、ナンノクロロプシス(Nannochloropsis)属の藻類も注目されている。この藻類は、C. reinhardtiiの100倍程の高密度で培養することが可能であることから、C. reinhardtiiよりもTAGの生産に適していると考えられる。

Field of industrial application (In Japanese)

本発明は、トリアシルグリセロール(以下、「TAG」という)高生産性藻類の作製法、及びTAG高生産性藻類、並びに前記藻類を用いたTAGの製造方法に関する。

Scope of claims (In Japanese)
【請求項1】
 
藻類(但し、クラミドモナス・レインハーディに属する藻類を除く)に以下の(1)及び(2)を含むコンストラクトを導入することを特徴とするトリアシルグリセロール高生産性藻類の作製法、
(1)トリアシルグリセロール合成酵素遺伝子、
(2)トリアシルグリセロール合成酵素遺伝子の上流に配置されるSQD2遺伝子のプロモーター、LDSP遺伝子のプロモーター、又はLPAT-Y遺伝子のプロモーター。

【請求項2】
 
藻類が、ナンノクロロプシス属、シュードコリシスチス属、フェオダクチラム属、オステレオコックス属、シアニディオシゾン属、クレブソルミディウム属、クロロキブス属、スピロギラ属、カラ属、コレオケーテ属、クロレラ属、又はフィスチュリフェラ属に属する藻類であることを特徴とする請求項1に記載のトリアシルグリセロール高生産性藻類の作製法。

【請求項3】
 
トリアシルグリセロール合成酵素遺伝子が、DGAT2遺伝子であることを特徴とする請求項1又は2に記載のトリアシルグリセロール高生産性藻類の作製法。

【請求項4】
 
トリアシルグリセロール合成酵素遺伝子が、DGTT4遺伝子であることを特徴とする請求項1又は2に記載のトリアシルグリセロール高生産性藻類の作製法。

【請求項5】
 
藻類が、ナンノクロロプシス属に属する藻類であることを特徴とする請求項1乃至4のいずれか一項に記載のトリアシルグリセロール高生産性藻類の作製法。

【請求項6】
 
コンストラクトが、トリアシルグリセロール合成酵素遺伝子の下流に配置され、コンストラクトを導入しようとする藻類と同種の藻類に由来する遺伝子の3'非翻訳領域を含むことを特徴とする請求項1乃至5のいずれか一項に記載のトリアシルグリセロール高生産性藻類の作製法。

【請求項7】
 
以下の(1)及び(2)を含むコンストラクトが導入されていることを特徴とするトリアシルグリセロール高生産性藻類(但し、クラミドモナス・レインハーディに属する藻類を除く)、
(1)トリアシルグリセロール合成酵素遺伝子、
(2)トリアシルグリセロール合成酵素遺伝子の上流に配置されるSQD2遺伝子のプロモーター、LDSP遺伝子のプロモーター、又はLPAT-Y遺伝子のプロモーター。

【請求項8】
 
藻類が、ナンノクロロプシス属、シュードコリシスチス属、フェオダクチラム属、オステレオコックス属、シアニディオシゾン属、クレブソルミディウム属、クロロキブス属、スピロギラ属、カラ属、コレオケーテ属、クロレラ属、又はフィスチュリフェラ属に属する藻類であることを特徴とする請求項7に記載のトリアシルグリセロール高生産性藻類。

【請求項9】
 
トリアシルグリセロール合成酵素遺伝子が、DGAT2遺伝子であることを特徴とする請求項7又は8に記載のトリアシルグリセロール高生産性藻類。

【請求項10】
 
トリアシルグリセロール合成酵素遺伝子が、DGTT4遺伝子であることを特徴とする請求項7又は8に記載のトリアシルグリセロール高生産性藻類。

【請求項11】
 
藻類が、ナンノクロロプシス属に属する藻類であることを特徴とする請求項7乃至10のいずれか一項に記載のトリアシルグリセロール高生産性藻類。

【請求項12】
 
コンストラクトが、トリアシルグリセロール合成酵素遺伝子の下流に配置され、コンストラクトを導入しようとする藻類と同種の藻類に由来する遺伝子の3'非翻訳領域を含むことを特徴とする請求項7乃至11のいずれか一項に記載のトリアシルグリセロール高生産性藻類。

【請求項13】
 
請求項7乃至12のいずれか一項に記載のトリアシルグリセロール高生産性藻類をリン欠乏条件下で培養し、藻類細胞中にトリアシルグリセロールを蓄積させ、蓄積したトリアシルグリセロールを採取することを特徴とするトリアシルグリセロールの製造方法。
IPC(International Patent Classification)
F-term
State of application right Registered
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