Top > Search of Japanese Patents > ANTI-SENSE OLIGONUCLEOTIDE HAVING INHIBITORY ACTION ON DREBRIN A EXPRESSION

ANTI-SENSE OLIGONUCLEOTIDE HAVING INHIBITORY ACTION ON DREBRIN A EXPRESSION meetings achieved

Patent code P03P000879
File No. A091P20
Posted date Jul 10, 2003
Application number P2001-107694
Publication number P2002-300884A
Patent number P4101467
Date of filing Apr 5, 2001
Date of publication of application Oct 15, 2002
Date of registration Mar 28, 2008
Inventor
  • (In Japanese)白尾 智明
  • (In Japanese)関野 祐子
  • (In Japanese)田中 聡一
Applicant
  • (In Japanese)国立研究開発法人科学技術振興機構
Title ANTI-SENSE OLIGONUCLEOTIDE HAVING INHIBITORY ACTION ON DREBRIN A EXPRESSION meetings achieved
Abstract PROBLEM TO BE SOLVED: To provide an anti-sense oligonucleotide having promising usefulness as a therapeutic drug for fragile X syndrome or the like and capable of specifically inhibiting drebrin A expression.
SOLUTION: An anti-sense oligonucleotide capable of hybridizing with 24-mer S-oligo(5'-AGGAAGGCCCACTGTCCGATGCCT-3') being an anti-sense chain of aggcatcggacagtgggccttcct (sequence number 5) in ins2 region which specifically exists in drebrin A and the sequence is suitably maintained beyond animal species, and the base sequence represented by the sequence number 5 under a stringent condition and having an inhibitory action on drebrin A expression, and derivatives thereof are produced.
Outline of related art and contending technology (In Japanese)


神経細胞は、他の体細胞には見られない非常に複雑な形状を有し、核をもつ原形質部分である細胞体からは、樹状突起と軸索突起という2種類の突起が伸びている。樹枝状に伸びる樹状突起はスパイン(spine)と呼ばれる無数の棘構造を有し、他の細胞からの情報を受け取る機能をもつシナプス後部を形成している。この神経細胞特異的形態は、神経特異的なアクチン結合タンパクにより決定される。他方、本発明者らは、発生過程の神経細胞に多量発現するアクチン結合タンパクドレブリン(Drebrin)を世界に先駆けて発見し(J. Neurochem. 44, 1210-1216(1985)、J. Biochem. 117, 231-236 (1995))、このドレブリンがアクチンファイバーの性状を変えることにより神経細胞の形態形成、特に突起形成に関わっていること(J. Neurosci. Res. 38: 149-159 (1994) 、Exp. Cell Res. 215:145-153 (1994) 、J. Biol. Chem. 269:29928-29933 (1994))や、発生中で移動している神経細胞では、細胞体と突起全体に存在するが、成熟した神経細胞では棘構造中に特異的に存在すること(J. Neurosci. 15: 7161-7170 (1996)、Dev. Brain Res. 29, 233-244 (1986)、Brain Res. 413, 374-378 (1987))を既に証明している。ドレブリンには、胚性型(embryonic type)のドレブリンEと成体型(adult type)のドレブリンAという2つのアイソフォームが存在しており(J. Biochem. 117, 231-236 (1995))、成熟した神経細胞のスパインに特異的に見られるドレブリンAは、神経細胞にしか発現しないという特徴を有している(Dev. Brain Res. 29, 233-244 (1986)、Brain Res. 413, 374-378 (1987))。ドレブリンAはalternative splicing機構によりドレブリンEに“ins2”と呼ばれる領域が加わった配列をしている。すなわち、5′側から956base~1093baseにgtcgtccgtactgccctttcataaaggcatcggacagtgggccttcctcctcctcctcttcctcctcttcccctccacggactccctttccctatatcacctgccaccgcaccccaaacctctcttcctccctcccat)[配列番号1]が挿入されて発現したものである(Mol. Brain Res. 19, 101-114 (1993)、Neuroreport 3, 109-112 (1992))。



また最近、本発明者らは、ドレブリンAを初代培養神経細胞に発現させると自動的に樹状突起スパインに集まり、しかもその長さを長くしたり、ある一つのタンパク合成量を変化させることによってスパインの形態を変化させることができることを報告している(J. Neurosci. 19, 3918-3925 (1999))。その他、ドレブリンの所属するタンパクファミリーに関して、ドレブリンがADF Homology Domainをもったアクチン結合タンパクの一種に分類できる可能性が示唆されている(Mol. Biol. Cell 9, 1951-1959 (1998))。また、ドレブリンのホモローグとしてSH3P7が発見されているが、SH3P7の機能が明らかになりつつある(Mol. Cell. Biol. 19, 1539-1546 (1999) 、Nature Biotech. 14, 741-744 (1996))。



その他、神経栄養因子BDNF(Brain-derived neurotrophic factor)を特異ノックアウトするアンチセンスオリゴヌクレオチドを作製し、外来性のBDNFがスパイン密度をインビボ及びインビトロで増加させるエストラジオールの効果を遮断し、選択的なアンチセンスオリゴヌクレオチドを用いたBDNFの発現抑制がエストラジオールに似た効果をもたらし、抗BDNF抗体によりスパイン密度が増加するなど、スパイン密度の調節に関与するBDNFの役割が明らかにされている(Proc. Natl. Acad. Sci. USA 95, 11412-11417, 1998)。また、脆弱X症候群(fragile X syndrome)は、X染色体にフラジャイル・サイトが存在するため起こる遺伝性の精神遅滞の原因としては最も頻度の高い病気であり、X染色体上の遺伝子FMR1の発現異常、主に発現欠損により引き起こされ、FMR1の発現異常は脳神経系の形態異常を伴うが、かかる脆弱X症候群などの脳神経疾患の治療法は、現在のところ見つかっていない。

Field of industrial application (In Japanese)


本発明は、ドレブリンA発現抑制作用を有するアンチセンスオリゴヌクレオチドやその誘導体、それらを担持したベクター、ドレブリンAの過剰発現・機能亢進に起因する疾病の治療薬等に関する。

Scope of claims (In Japanese)
【請求項1】
 
配列番号6に示される塩基配列からなるアンチセンスオリゴヌクレオチド。

【請求項2】
 
配列番号5に示される塩基配列とストリンジェントな条件下でハイブリダイズし、かつドレブリンA発現抑制作用を有するアンチセンスオリゴヌクレオチド。

【請求項3】
 
請求項1又は2記載のアンチセンスオリゴヌクレオチドのリン酸エステル基をチオリン酸エステル基或いはメチルホスホネート基で置換したもの、及び、請求項1又は2記載のアンチセンスオリゴヌクレオチドのリボース部分の水酸基をメトキシ或いはアリロキシからなるアルコキシ基、アミノ基、又はフッ素原子で置換したもの、から選択される請求項1又は2記載のアンチセンスオリゴヌクレオチドの誘導体。

【請求項4】
 
請求項1又は2記載のアンチセンスオリゴヌクレオチド及び/又は請求項3記載のアンチセンスオリゴヌクレオチドの誘導体を担持したベクター。

【請求項5】
 
配列番号7示されるアミノ酸配列からなるペプチドを特異的に認識する抗体。

【請求項6】
 
モノクローナル抗体であることを特徴とする請求項5記載の抗体。

【請求項7】
 
請求項1又は2記載のアンチセンスオリゴヌクレオチド及び/又は請求項3記載のアンチセンスオリゴヌクレオチドの誘導体を有効成分とするドレブリンAの過剰発現・機能亢進に起因する疾病の治療薬。

【請求項8】
 
請求項1又は2記載のアンチセンスオリゴヌクレオチド及び/又は請求項3記載のアンチセンスオリゴヌクレオチドの誘導体と薬学的に許容される細胞内導入試薬とからなるドレブリンAの過剰発現・機能亢進に起因する疾病の治療薬。
IPC(International Patent Classification)
F-term
Drawing

※Click image to enlarge.

21243_01SUM.gif
State of application right Registered
License status (In Japanese)通常実施権[C07-04]
Reference ( R and D project ) CREST Creating the Brain AREA
Please contact us by E-mail or facsimile if you have any interests on this patent.


PAGE TOP

close
close
close
close
close
close
close