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(In Japanese)細胞標識剤及び細胞標識キット

Patent code P210017459
File No. (S2018-0349-N0)
Posted date Mar 12, 2021
Application number P2019-569074
Date of filing Jan 25, 2019
International application number JP2019002440
International publication number WO2019151128
Date of international filing Jan 25, 2019
Date of international publication Aug 8, 2019
Priority data
  • P2018-018172 (Feb 5, 2018) JP
Inventor
  • (In Japanese)徐 岩
  • (In Japanese)石塚 匠
  • (In Japanese)趙 珮妍
Applicant
  • (In Japanese)国立大学法人宮崎大学
Title (In Japanese)細胞標識剤及び細胞標識キット
Abstract (In Japanese)細胞標識剤は、細胞のシアル酸生合成経路でシアル酸に代謝される6員環構造の単糖誘導体を含む。単糖誘導体における6員環を構成する炭素原子に結合した基のうち、シアル酸生合成経路で代謝されても変化しない少なくとも1つの基が、炭素と炭素との二重結合又は三重結合を有する環構造を含む。
Outline of related art and contending technology (In Japanese)

シアル酸生合成経路による単糖類の代謝を利用して、細胞表面にある糖鎖を標識する代謝ラベリング法が知られている。代謝ラベリング法では、例えば、アジド基を有するN-アセチルマンノサミン(ManNAc)の誘導体(ペルアセチル化N-アジドアセチルマンノサミン、Ac4ManNAz)が使用される。細胞内に取り込まれたAc4ManNAzは、細胞質で酵素によって脱アセチル化され、対応するN-アジドアセチルシアル酸(SiaNAz)に代謝される。SiaNAzはシアロ糖複合体に組み込まれる。そして、SiaNAzは糖鎖とともに細胞表面に提示される。SiaNAzが有するアジド基には、銅触媒を用いたアジド-アルキンの付加環化反応(CuAAC)等のクリック反応によって、蛍光色素等を有するレポーター物質を付加することができる。

非特許文献1には、ペルアセチル化N-(4-ペンチノイル)マンノサミン(Ac4ManNAl)を用いた代謝ラベリング法が開示されている。Ac4ManNAlは細胞において対応するシアル酸(SiaNAl)に代謝され、SiaNAlが細胞表面に提示される。SiaNAlは末端にアルキンを有するため、当該アルキンとアジドとをCuAACで反応させることで、レポーター物質を細胞表面の糖鎖に付加することができる。

Field of industrial application (In Japanese)

本発明は、細胞標識剤及び細胞標識キットに関する。

Scope of claims (In Japanese)
【請求項1】
 
細胞のシアル酸生合成経路でシアル酸に代謝される6員環構造の単糖誘導体を含み、
前記単糖誘導体における6員環を構成する炭素原子に結合した基のうち、前記シアル酸生合成経路で代謝されても変化しない少なくとも1つの基が、
炭素と炭素との二重結合又は三重結合を有する環構造を含む、
細胞標識剤。

【請求項2】
 
前記単糖誘導体は、
前記環構造を含む基をRとして、式(I)
【化1】
 
(省略)
で表される、
請求項1に記載の細胞標識剤。

【請求項3】
 
前記単糖誘導体は、
前記環構造を含む基をRとして、式(II)
【化2】
 
(省略)
で表される、
請求項1に記載の細胞標識剤。

【請求項4】
 
前記単糖誘導体は、
前記環構造を含む基をRとして、式(III)
【化3】
 
(省略)
で表される、
請求項1に記載の細胞標識剤。

【請求項5】
 
前記Rは、
下記(a)~(m)
【化4】
 
(省略)
からなる群から選択される、
請求項2から4のいずれか一項に記載の細胞標識剤。

【請求項6】
 
請求項1から5のいずれか一項に記載の細胞標識剤と、
前記細胞の外に提示された、前記シアル酸生合成経路で代謝されても変化しない前記基と反応して前記シアル酸に結合するレポーター物質と、
を備える、細胞標識キット。
IPC(International Patent Classification)
F-term
Drawing

※Click image to enlarge.

JP2019569074thum.jpg
State of application right Published


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