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γ-POLYGLUTAMIC ACID DEGRADATION ENZYME-DEFECTIVE MUTANT, METHOD FOR OBTAINING THE SAME AND METHOD FOR PRODUCING γ-POLYGLUTAMIC ACID USING THE SAME

Patent code P04A004806
Posted date Nov 29, 2004
Application number P2002-030237
Publication number P2003-230384A
Patent number P3682435
Date of filing Feb 7, 2002
Date of publication of application Aug 19, 2003
Date of registration May 27, 2005
Inventor
  • (In Japanese)木村 啓太郎
  • (In Japanese)伊藤 義文
Applicant
  • (In Japanese)国立研究開発法人農業・食品産業技術総合研究機構
Title γ-POLYGLUTAMIC ACID DEGRADATION ENZYME-DEFECTIVE MUTANT, METHOD FOR OBTAINING THE SAME AND METHOD FOR PRODUCING γ-POLYGLUTAMIC ACID USING THE SAME
Abstract PROBLEM TO BE SOLVED: To provide a γ-polyglutamic acid-producing microorganism in which γ-polyglutamic acid is stably produced in high yield, the obtained γ-polyglutamic acid is not enzymatically degraded and the molecular weight distribution is in a constant region, a method for obtaining the same and a method for producing γ-polyglutamic acid using the microorganism.
SOLUTION: Disclosed are a γ-polyglutamic acid degradation enzyme-defective mutant in which a γ-glutamyltranspeptidase gene is mutated in the γ- polyglutamic acid-producing microorganism, a γ-polyglutamic acid degradation enzyme-defective mutant in which a γ-glutamic acid hydrase gene is mutated, a γ-polyglutamic acid degradation enzyme-defective mutant in which the γ- glutamyltranspeptidase gene and the γ-glutamic acid hydrase gene are mutated, the method for obtaining these mutants and the method for producing γ- polyglutamic acid using the microorganisms.
Outline of related art and contending technology (In Japanese)



従来、納豆菌を含むバチルス・ズブチリス(Bacillus subtilis)、バチルス・リケニホルミス(Bacillus licheniformis)等のγ-ポリグルタミン酸生産微生物を用いるγ-ポリグルタミン酸の製造においては、生産されたγ-ポリグルタミン酸が、当該微生物自身が作るγ-ポリグルタミン酸分解酵素によって分解されるため、収量や当該γ-ポリグルタミン酸の分子量が一定しないという問題があった。

ところで、γ-ポリグルタミン酸は納豆の糸引きの主成分であり、γ-ポリグルタミン酸の含量と分子量などの化学構造が納豆の糸引きや粘りを大きく左右する。また、消費者の納豆の粘りに対する要望は様々であり、粘りの強い納豆のニーズも高いが、これまではこれらに十分対応する製品が得られていない。

一方、最近、γ-ポリグルタミン酸に小腸からのカルシウムの吸収を促進する作用があることが発見(Tanimoto H, Mori M, Motoki M, Torii K, Kadowaki M,Noguchi T, Natto mucilage containing poly-gamma-glutamic acid increases soluble calcium in the rat small intestine. Biosci Biotechnol Biochem. 2001 Mar;65(3):516-21. )され、γ-ポリグルタミン酸をカルシウム吸収促進剤として利用することについても検討されている。

Field of industrial application (In Japanese)



本発明は、γ-ポリグルタミン酸分解酵素欠損変異株及び該変異株を用いたγ-ポリグルタミン酸の製造法に関する。

Scope of claims (In Japanese)
【請求項1】
 
γ-グルタミルトランスペプチダーゼ遺伝子にスペクチノマイシン耐性遺伝子が挿入され、かつγ-ポリグルタミン酸ハイドロラーゼ遺伝子にエリスロマイシン耐性遺伝子が挿入されたバチルス・ズブチリスNAF M61株(FERM P-18688)。

【請求項2】
 
化学的変異処理もしくは物理的変異処理によりγ-グルタミルトランスペプチダーゼ遺伝子及びγ-ポリグルタミン酸ハイドロラーゼ遺伝子に変異を誘起したバチルス・ズブチリスNAF M5-005株(FERM P-18695)。

【請求項3】
 
請求項1または2に記載のγ-ポリグルタミン酸分解酵素欠損変異株を培地に培養し、培養物からγ-ポリグルタミン酸を採取することを特徴とするγ-ポリグルタミン酸の製造法。
IPC(International Patent Classification)
F-term
Drawing

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13332_01SUM.gif
State of application right Registered


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