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(In Japanese)ゲノムの機能を制御する核内因子の局在と修飾に関する化学遺伝学的研究

Research report code R013000201
Posted date Oct 1, 2003
  • (In Japanese)吉田 稔
  • (In Japanese)西野 憲和
  • (In Japanese)小松 靖彦
  • (In Japanese)東京大学大学院農学生命科学研究科
  • (In Japanese)九州工業大学
Research organization
  • (In Japanese)九州工業大学
  • (In Japanese)東京大学大学院農学生命科学研究科
Report name (In Japanese)ゲノムの機能を制御する核内因子の局在と修飾に関する化学遺伝学的研究
Technology summary (In Japanese)核外移行シグナル(NES)による蛋白質核外移行や核蛋白質のアセチル化は,核内シグナル伝達に極めて重要な役割を果たしていると推測される。まず,実験材料の分裂酵母の全ゲノムORFをGATEWAY法によりプラスミドベクターへクローニングし,約6割について正しいORFがクローニングされていることを確認した。次に,ヒストンデアセチラーゼ(HDAC)の複数のアイソザイムの機能を調べるために組換え酵素を作り特異性を調べた。著しい選択性が見られ,この選択性を利用しHDAC6の細胞内基質の固定が可能になると考え,新規に調製した抗アセチル化リジン抗体を用い,トリコスタチンで著しくアセチル化が蓄積し,トラポキシンでは全くアセチル化されない蛋白質を見い出した。温度感受性変異型p53(がん抑制蛋白質)はレプトマイシンB処理により37℃で核へ移行し,自身のNES,核移行シグナル(NLS)によって細胞内局在が規定されることが示された。
Research field
  • Biological function
  • Enzyme in general
  • Structure and chemistry of genes
  • Basic research of enzyme preparations and enzyme inhibitor preparations
Published papers related (In Japanese)(1)Kudo, N., Matsumori, N., Taoka, H., Fujiwara, D., Schreiner, E. P., Wolff, B., Yoshida, M. & Horinouchi, S. Leptomycin B inactivates CRM1/exportin 1 by covalent modification at a cysteine residue in the central conserved region. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 96, 9112-9117 (1999).
(2)Furumai, R., Komatsu, Y., Nishino, N., Khochbin, S., Yoshida, M. & Horinouchi, S. Potent histone deacetylase inhibitors built from trichostatin A and cyclic tetrapeptide antibiotics including trapoxin. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 98, 87-92 (2001).
(3)Akakura, S., Yoshida, M., Yoneda, Y. & Horinouchi, S. A role for Hsc70 in regulating nucleo-cytoplasmic transport of a temperature-sensitive p53 (p53Val135). J. Biol. Chem. (in press, 2001).
Research project
  • Core Research for Evolutional Science and Technology;Structure and Function of Genomes
Information research report
  • (In Japanese)吉田 稔,西野 憲和,小松 靖彦. ゲノム機能を制御する核内因子の局在と修飾に関する化学遺伝学的研究. 戦略的基礎研究推進事業「ゲノム構造と機能」 公開シンポジウム 要旨集,2001. p.8 - 9.