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(In Japanese)蛍光標識アミノ酸の導入によるタンパク質の新規構造機能解析法の開発

Research report code R070000208
File No. R070000208
Posted date Apr 11, 2008
Researchers
  • (In Japanese)芳坂 貴弘
Affiliation
  • (In Japanese)北陸先端科学技術大学院大学材料科学研究科
Research organization
  • (In Japanese)北陸先端科学技術大学院大学材料科学研究科
Report name (In Japanese)蛍光標識アミノ酸の導入によるタンパク質の新規構造機能解析法の開発
Technology summary (In Japanese)蛍光共鳴エネルギ移動(FRET)は、通常のX線結晶構造解析では知ることのできないタンパク質の立体構造変化を検出することができる手法として、非常に有用な手法である。しかしタンパク質の特定の2ヶ所へ定量的に蛍光分子を導入することはこれまで困難であった。本研究では我々がこれまで開発してきた4塩基コドンによる非天然アミノ酸のタンパク質への導入技術を利用して、FRETのドナー・アクセプターとなる蛍光標識アミノ酸を特定の2ヶ所に導入したタンパク質を合成した。そして、フォールディングやタンパク質問相互作用によるタンパク質の構造変化をFRETにより検出することを検討し、タンパク質の新規構造機能解析法としての確立を行なった。
Drawing

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Research field
  • Biophysical research methods
  • Molecular structure
Published papers related (In Japanese)(1) Daisuke Kajihara, Takahiro Hohsaka, Masahiko Sisido, Synthesis and Sequence Optimization of GFP Mutants Containing Aromatie Nonnatural Amino Acids at the Tyr66 Position. Protein Eng. Des. Sel., 2005, 18, 273-278.
(2) Hikaru Taira, Masaharu Fukushima, Takahiro Hohsaka, Masahiko Sisido, Four-Base Codon-Mediated Incorporation of Nonnatural Amino Acids into Proteins in a Eukaryotic Cell-Free Transltion System. J. Blosci. Bioeng., 2005, 99, 473-476.
(3) Takahiro Hohsaka, Norihito Muranaka, Chie Komiyama, Kinue Matsui, Satomi Takaura, Ryoji Abe, Hiroshi Murakami, Masahiko Sisido, Position-Specific Incorporation of Dansylated Non-natural Amino Acids into Streptavidin by using a Four-Base Codon. FEBS Lett., 2004, 560, 173-177.
(4) Takahiro Hohsaka, Incorporation of Nonnatural Amino Acids into Proteins through Extension of the Genetic Code. Bull. Chem. Soc. Jpn., 2004, 77, 1041-1049.
(5) 芳坂貴弘、DDS研究のためのタンパク質工学技術~遺伝暗号の拡張による非天然型アミノ酸のタンパク質への導入~.Bioベンチャー、2004、11-12、69-71.
(6) 芳坂貴弘、遺伝暗号を拡張して新しいタンパク質をつくる.現代化学、2004、4、24-29.
Research project
  • Precursory Research for Embryonic Science and Technology.;Structure and Function of Biomolecules
Information research report
  • (In Japanese)芳坂 貴弘. 蛍光標識アミノ酸の導入によるタンパク質の新規構造機能解析法の開発. 2005年度“たんぱく質関連領域”合同シンポジウム 要旨集 「生体分子の形と機能」, 2005. p.33 - 36.

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