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微生物を用いたスフインゴ糖脂質の製造方法


シーズコード	S110006126
掲載日	2011年11月7日
研究者	伊東信末吉紀行澄田智美
技術名称	微生物を用いたスフインゴ糖脂質の製造方法
技術概要	配列番号１の塩基配列ならびに配列番号２のアミノ酸配列を有するβ－グルコシダーゼ遺伝子（ｇｌｃ４）、配列番号３の塩基配列ならびに配列番号４のアミノ酸配列を有するβ－グルコシダーゼ遺伝子（ｇｌｃ８）、配列番号５の塩基配列ならびに配列番号６のアミノ酸配列を有するβ－グルコシダーゼ遺伝子（ｇｌｃ２８）である。配列番号７の塩基配列ならびに配列番号８のアミノ酸配列を有するβ－ヘキソサミニダーゼ遺伝子（ｈｅｘ３６）である。これらのエキソ型ガングリオシド分解酵素（β－グルコシダーゼ、β－ヘキソサミニダーゼなど）を産生するのはＰａｅｎｉｂａｃｉｌｌｕｓ　ｓｐ．ＴＳ１２　ＦＥＲＭ　Ｐ－１８４１６（ＴＳ１２株）である。この菌株由来のβ－ヘキソサミニダーゼ遺伝子およびβ－グルコシダーゼ遺伝子を大腸菌に導入して組換えポリペプチドを得る。エキソ型ガングリオシド分解酵素産生菌ＴＳ１２株を粗ガングリオシドと共培養して各種スフィンゴ糖脂質を製造する。図２はＴＳ１２株のＧＭ１の分解様式を示し、時間経過とともにＧＭ１は減少してアシアロＧＭ１（ＡｓＧＭ１）が増加し、さらにＬａｃＣｅｒを経て、最終的にＧｌｃＣｅｒに変換される。
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研究分野	分子構造微生物の生化学
展開可能なシーズ	新規なエキソ型ガングリオシド分解酵素を産生し、単独でＧＤ１ａ、ＧＭ１等のガングリオシドを完全に分解できるエキソ型ガングリオシド分解酵素産生菌Ｐａｅｎｉｂａｃｉｌｌｕｓ　ｓｐ．と、新規なエキソ型ガングリオシド分解酵素と、新規なエキソ型ガングリオシド分解酵素を生産する製造方法とを提供する。微生物起源の特異性の厳格なエキソ型グリコシダーゼを用いることによって糖鎖シーケンサーを開発することが可能となる。Ｐａｅｎｉｂａｃｉｌｌｕｓ　ｓｐ．　ＴＳ１２　ＦＥＲＭ　Ｐ－１８４１６によりグルコシルセラミド（ＧｌｃＣｅｒ）を製造することが可能となる。シアリダーゼ阻害剤等を併用することにより、ＧＭ２、ＧＭ３等の短鎖ガングリオシドを製造することが可能となる。セラミドを製造することが可能となる。高度に精製した酵素を用いて細胞表面糖鎖のトリミング法を開発することが可能となる。Ｐａｅｎｉｂａｃｉｌｌｕｓ　ｓｐ．　ＴＳ１２　ＦＥＲＭ　Ｐ－１８４１６には、ガングリオシドに作用するガラクトシダーゼ及びシアリダーゼが存在するので、これら新規遺伝子を提供することが可能である。
用途利用分野	セラミド、グルコシルセラミド、短鎖ガングリオシド、糖鎖シーケンサー
出願特許		特許	国際特許分類(IPC)
出願特許	( 1 )	国立大学法人九州大学， . 伊東信，末吉紀行，澄田智美， . 微生物を用いたスフィンゴ糖脂質の製造方法. 特開2003-061663. 2003-03-04	C12N 15/09 C12N 9/24 C12P 19/44 C12R 1/01