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(In Japanese)光連結性ヌクレオシド含有DNAを用いて塩基を点変異する方法

Seeds code S090002148
Posted date Mar 19, 2010
Researchers
  • (In Japanese)齋藤 烈
  • (In Japanese)藤本 健造
  • (In Japanese)松田 成夫
Name of technology (In Japanese)光連結性ヌクレオシド含有DNAを用いて塩基を点変異する方法
Technology summary (In Japanese)ステップ1のシトシンを含有する核酸類のシトシンの直前までをテンプレートにハイブリダイズさせて固定し、ビニル基含有の光連結性ヌクレオシドを含有するDNAを同様にテンプレートに固定する。ステップ2においてこれに光照射してシトシンと光連結性ヌクレオシドのビニル基とでシクロブタン環を形成させる。ステップ3において、水などの酸素を含有する物質の存在下に加熱処理してシトシンの脱アミノ化を行う。脱アミノ化が終了したら、ステップ4においてシクロブタン環を解裂させるための光(例えば、波長302nmの光)を照射して両者を切り放すとシトシンがウラシルに変換された核酸類を得ることができる。
Drawing

※Click image to enlarge.

S090002148_01SUM.gif
Research field
  • Manufacturing of various organic compounds
  • Nucleic acids in general
  • Gene manipulation
Seeds that can be deployed (In Japanese)簡便で確実でかつ特異的であって、さらに低コストで無公害の点変異法を提供すること。低コスト、無公害、簡便性、正解性を併せ持った新技術を用いる実用化可能な遺伝子操作法を開発すること。すなわち、光化学反応を利用した新規な点変異技術を提供する。
後処理の必要な化学活性化剤や使用条件に制限がかかる酵素を全く用いずに、光をトリガーとして用いるシトシンからウラシルへの点変異できる。環境にやさしい21世紀型のバイオテクノロジー技術である。任意の位置のシトシンをウラシルへと点変異させることができる。
Usage Use field (In Japanese)光誘導型変異蛋白
Application patent   patent IPC(International Patent Classification)
( 1 ) (In Japanese)国立研究開発法人科学技術振興機構, . (In Japanese)齋藤 烈, 藤本 健造, 松田 成夫, . METHOD FOR POINT MUTATION OF BASE USING PHOTOCOUPLING NUCLEOSIDE-CONTAINING DNA. P2002-179696A. Jun 26, 2002
  • C07H  21/04     
  • C12N  15/01     
  • C12N  15/09     

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